32 вывода к 32 годам: 32 вывода к 32 годам

Содержание

32 вывода к 32 годам

Татьяна Бурцева

Сегодня, 3 января, мне исполнилось 32 года. Обычно все знакомые подводят итоги года до новогоднего обращения президента к стране, а у меня есть еще пару дней, чтобы оглянуться назад и сделать выводы. Например, в 2019 году у меня возникла внезапная симпатия к Берлину. Вывод: поехать еще раз, но уже на подольше. Или: за последние два месяца я ни разу не ложилась спать раньше полуночи. Вывод: это стоит исправить.

К подведению итогов все относятся по-разному, я воспринимаю это как здоровый интерес к собственному будущему: что я могу делать и что делать не надо, чтобы быть сильной, гармоничной и вдохновляющей личностью?

Я замечаю, как, перешагнув через 30-летний рубеж, мои знакомые открывают собственный бизнес, сознательно откладывают рождение детей, идут учиться на врачей и меняют города и страны. Кажется, только к этому возрасту мы начинаем понимать, кто мы есть, чего мы хотим, куда планируем двигаться. Эти 32 вывода, которые я записала в своем блокноте накануне 32-летия, как раз об этом. Быть может, мы пересекаемся?

1. Каждый день — важен

Однажды я поймала себя на мысли, что в понедельник мечтаю, чтобы рабочие дни пролетели как можно скорее. То есть я сознательно была готова проматывать целые недели, но ради чего?

Люди — хрупкие, и мы не знаем, сколько дней нам осталось. И поэтому я хочу делать то, что нравится, говорить другим о своей симпатии, отказываться от всего сомнительного и опасного, бросать то, что вытягивает силы и больше не приносит радости.

2. Жизнь прекрасна

То, каким местом к нам поворачивается жизнь, не всегда зависит от нас. Но мы можем сами выбирать свою реакцию на происходящее. Тратить время на обиды и бойкот, предполагая, что близкий человек сам должен знать, что натворил, или открыто и без претензий поговорить о том, что взаимопонимание утеряно? Сидеть дома и ненавидеть зиму или пойти и купить абонемент в бассейн?

3. Люди — хорошие

Когда я чувствую, что злюсь на кого-то (например, на консультанта в магазине, который меня игнорирует), то обращаюсь к презумпции невиновности: «Обвиняемый считается невиновным, пока его виновность не будет доказана». И это не значит, что надо срочно искать доказательства. Люди — хорошие, но у них тоже бывают плохие дни. А если жить с установкой, что все вокруг враги — то жизнь становится невыносимой.

4. Токсичные люди существуют. К сожалению

Это, конечно, уже всем известно. И тем не менее: с ними правда стоит перестать общаться. Самое сложное — если это родственники. Но и в этом случае нужно максимально сокращать общение.

Если вы часто становитесь объектом сарказма, высмеивания, манипуляции, если вас учат жить, и постоянно комментируют вес, прическу, одежду — бегите. Все это пассивная агрессия, которой вы подвергаетесь. Ничто не стоит вашего душевного равновесия и здоровья.

5. Мы не обязаны любить

Любовь, как и другие чувства и эмоции, нельзя навязать. Слышали ли вы фразы вроде «Это же твоя сестренка (племянница/муж/брат), ты должна ее любить»? Обычно реакция бывает совершенно противоположная. Испытано на себе. Не лЮбите — не любИте. Только не изображайте любовь.

6. Мы имеем право на разные эмоции. Но их нужно проговаривать

Все люди на свете — и младенцы, и дети, и подростки, и взрослые — испытывают разные эмоции. И вы, и я. У нас есть право злиться, грустить, ненавидеть, радоваться, стесняться. И закупоривать это в себе опасно. К 30 годам я поняла, что в половине случаев даже не знаю, какую эмоцию испытываю в данный момент. И когда я начала сама себе это проговаривать, постепенно учиться понимать то, что я чувствую и почему — проще стало общаться и с людьми вокруг. «Ага, он сейчас расстроен, потому что устал на работе и не успел пообедать. Дело не во мне».

7. Мы имеем право на ошибки

Ошибаются все. И в работе, и в личной жизни. Важно научиться с этим работать. Мне, например, оказалось легче прощать ошибки другим, чем себе. И пока я еще не переборола это.

8. Надо говорить людям хорошее

Даже незнакомым. В мире должно быть больше хорошего, чем плохого. Почему нам бывает проще сказать какую-то гадость, чем что-то приятное? К 32 годам я наконец-то перестала стесняться хвалить незнакомцев. Например, сказать художнице, что она рисует потрясающие открытки. Или поблагодарить консультанта в магазине за помощь с выбором.

9. Личные границы нужно не только оберегать, но и видеть

У каждого из нас свой радиус «личной границы», и если кто-то прорвался слишком близко — это стоит пресекать. Но тут еще и важно понимать, где эти границы начинаются и заканчиваются. И могут ли они меняться со временем. Вы с этим разобрались?

10. Смерть пугает, но ее не стоит замалчивать

За последний год я заметила, как люди вокруг боятся говорить о смерти. Не только с детьми, но и со взрослыми. Пожилой человек скажет «Вот я скоро умру…», и мы начинаем отмахиваться «да когда это будет! Перестань». Или ребенок спросит, куда делась канарейка, а мы рассказываем, что она улетела на радугу и, кстати, там вообще отлично, но на этом все.

Я до ужаса боюсь старости и смерти (и близких, и своей). И, как мне кажется, на многих так влияет именно это табу, ведь мы сделали из этого страшилку, о которой нельзя говорить.

11. Работа — не главное

Я люблю свою работу, но делать ее основой жизни — занятие вредное. Я запретила себе включать компьютер в выходные без острой необходимости, пропускать обеденный перерыв и работать до часу ночи. Кроме работы должны быть другие увлечения и занятия. Иначе — выгорание.

12. Работа может быть любимой

Я свою нашла. Не переставайте искать, если вы так сказать не можете.

13. Не надо жалеть деньги на путешествия

Кредиты — зло. Покупать каждые выходные новые вещи — плохо. Экономить можно хоть на чем, но не на путешествиях. Когда я была ребенком, мои родители каждый год делали выбор в пользу путешествия, а не ремонта в квартире. Я видела другие страны, национальности, обычаи — и училась воспринимать мир разным. Путешествия обогащают нас и наши внутренние миры, поэтому я стараюсь уезжать при первой же финансовой возможности.

14. Телевизор лучше выбросить

У меня нет телевизора уже 8 лет. У многих моих знакомых — тоже. И, знаете, разница в общении с теми, кто от телевизора не отходит, чувствуется сразу.

15. Я больше не маленькая девочка

Ужасно, но осознание этого пришло ко мне лишь месяц назад. Я больше не маленькая девочка: хватит искать то, что мне недодали в детстве, хватит просить любви там, где ее не умеют выражать. Теперь моя очередь быть взрослой, моя очередь дать детям любовь, поддержку, доверие, возможность быть собой.

16. Запрограммировать себя на рост

Есть две установки: на данность и на рост. Либо ты говоришь «я не смогу», «я никогда это не сделаю», «у тебя не получится», либо всегда верить в то, что развитие возможно. Когда я начинаю буксовать или сомневаться в своих возможностях, я выбираю установку на рост.

17. Мир меняется, и нам тоже нужно меняться

Однажды выучившись на мастера по маникюру, фитнес-тренера или менеджера по продажам — нельзя останавливаться в развитии. Навыки нужно повышать, ведь время не стоит на месте, а ученые каждый день делают новые открытия.

18. Выходить из зоны комфорта не обязательно

Я не поддерживаю идею о том, что нужно выходить из зоны комфорта, чтобы развиваться. Вне зоны комфорта — зона дискомфорта. А когда ты чувствуешь себя плохо — о каком развитии идет речь? По-моему, чтобы развиваться, можно читать. И общаться с классными людьми. И делать что-то новое.

19. Не обесценивать

«Боишься летать? Да это ерунда», «Кто-то обозвал толстой? Не обращай внимания».

Мы часто обесцениваем других людей, даже неосознанно. Не стоит обвинять, стыдить других людей, говорить «а вот им еще хуже». Как и позволять им делать то же самое с вами. Не знаете, что сказать, когда кто-то говорит о своем страхе или боли — обнимите.

20. Бессмысленное соперничество с другими стоит прекратить

Я, например, всю жизнь соревнуюсь со своим братом. К сожалению, подобное происходит во многих семьях моих сверстников. Так нас всех воспитывали: нам нужно было приносить пятерки из школы, мы слышали фразы «Ты же девочка» и «Ты же старше», которые запрограммировали нас на сравнение. Сын маминой подруги всегда лучше. Внучка бабушкиной знакомой уже родила, вышла замуж и живет в Москве, а ты — нет.

Иногда стоит признать, что другой человек — уже выиграл. Например, потому что он — мальчик, а мальчиков в семье любят больше. И на этом все. Всю жизнь тратить силы на соперничество — вот, что будет проигрышем.

21. Над отношениями надо работать

Над любыми — с любимым человеком, с родителями, с коллегами. Конфликты сами собой не рассасываются, близость волшебным образом не возникает.

22. В любой непонятной ситуации — ищи триггер

Если постоянно возникают ситуации, которые сводят вас с ума, пора поискать триггер. Что именно вас расстроило в этот момент? Найдете триггер — решите проблему. Не нашли триггер — идите на пробежку (полезно и чистит голову).

23. Лень — это лишь нехватка энергии

Если ничего не хочется делать — это звонок в огромный колокол. Похоже, кому-то не хватает энергии, а значит надо отдохнуть. Или продолжать ничего не делать. Прокрастинация, кстати, бывает полезной, а мозг подкидывает гениальные идеи.

24. Соцсети — это не зло. Но сокращать их следует

У старшего поколения сформировалось очень негативное отношение к социальным сетям. «Он все время в телефоне», — говорят они. Но, если подумать, это лишь развитие технологий, которые позволяют нам делиться с другими своими мыслями, впечатлениями, опытом. Мы можем оставаться на связи даже с теми, кто далеко. Но, конечно, цифровой минимализм тоже необходим.

25. У всех разные мечты

Если кто-то хочет дом у моря и троих детей к 35 годам — это не значит, что это нужно именно вам. Кто-то хочет стать актрисой, а не классным экономистом. И пробежать марафон, а не стать «лучшим сотрудником месяца» в офисе. Тут главное разобраться в том, что именно хочу я.

26. Мир очень разнообразный. И каждый имеет право быть таким, какой он есть

Дискриминация в любом виде вызывает у меня отторжение. Мир такой огромный и разнообразный — и это так восхищает. В нем есть разные люди разной национальности, сексуальной ориентации и вероисповедания. В нем живут и творят люди с разными интересами и обычаями. И если это не наносит никому вреда (а в большинстве случаев это именно так) — то это прекрасно.

27. Нам всем нужен психолог

Мы идем к врачу, когда у нас болит горло, но не обращаемся к специалисту, если болит душа. В наших головах очень много стереотипов, шаблонов, обид и детских травм, с которыми стоит разобраться, чтобы дышать полной грудью. Это не волшебная пилюля, которая решит все наши проблемы, но это серьезный шаг навстречу самому себе.

28. Нужно заботиться о своем теле

К 32 годам это становится очевидным. Безопасной дозы алкоголя не существует. Глютен и лактоза — вредят организму. Движение необходимо. Когда я стала относиться к питанию и спорту не как к способу покупать джинсы на три размера меньше, а как к необходимости заботиться о своем здоровье — придерживаться полезных привычек стало в три раза проще.

29. Сон — очень важен

Для меня это отдельный пункт и пока нерешенная проблема. Сон оказывает на нас огромное влияние, и пренебрегать им = вредить себе по всем фронтам.

30. Физнагрузки все-таки нужны

Еще один пункт, который хочется вынести отдельно. Двигаться важно, но в удовольствие. Бегай. Не можешь бегать — плавай. Не можешь бегать и плавать — гуляй, ходи пешком.

31. Пора заботиться о планете и следить за своими привычками

Планете плохо. Пора открыть глаза и начать следить за собой. Отказаться от пластика, от цирков с животными, от спонтанных покупок. Узнайте, куда можно сдать вещи на переработку и куда выбрасывать батарейки.

32. Забыть о возрасте

Нет того, для чего можно стать слишком старым. В 30 лет я уже слишком стара, чтобы красить волосы в розовый цвет? Нет. В 40 лет я уже слишком стара, чтобы менять работу? Нет. В 50 лет я стара, чтобы влюбиться или переехать? Снова нет. Возраст — это цифры в паспорте. А жизнь — яркая и интересная.

32 вывода к 32 годам. Точнее, сразу после | by Alexander Zdrok

Давно хотел начать вести блог. Но постоянно находил какие-то уважительные причины, чтобы этого не делать. Теперь что-то все эти причины мне не кажутся таким уж уважительными.

Недавно появилась мода писать такие статьи. По-крайней мере я заметил это недавно. Конечно, если посмотреть на это все, как бы с высоты, то всё в мире это мода или культура. Для меня эти понятия очень близки. Конкретно эта мода, конкретно сейчас мне очень нравится, я вижу в ней смысл. Вот мой список выводов.

Многие из этих выводов не совсем выводы или совсем не выводы. Некоторые между собой очень сильно пересекаются. Но это моя статья — что хочу, то и делаю. И да, похоже, что выводов не 32.

Я пишу этот список в первую очередь для себя. Почти по каждому из пунктов я могу сделать отдельную статью, провести презентацию или лекцию. Но в этой статье я буду стараться быть кратким. Все таки, в первую очередь пишу этот список для себя.

Список не структурированный, но пункты из него можно условно объединить в несколько групп:
— что работает, что нет на на личном и около того уровне
— представление о текущем мире, в котором я живу
— представление о будущем

1/ Честность с самим собой — основа вообще всего.
У этой мысли очень много граней. Я постоянно нахожу новые и новые.

Если ты действительно очень честно чего-то хочешь, то не так уж тяжело это делать, отказываться от вещей, которые этому мешают или просто не помогают.

Практически всегда принятие решения можно свести к бинарному выбору. Просто да или нет. Это или то. Ничего сложного в этом нет. Можно этот выбор честно оценивать исходя из своих желаний, состояний, стремлений и так далее. Когда я начал пытаться использовать этот подход, то оказалось, что очень много решений, которые влияют на мою жизнь я на самом деле не принимал, а просто делал (а часто и продолжаю делать) потому, что всегда так делал, привык так делать, так делать нормально, а не потому что я сам решил так делать. Вот так.

Или вот пример. Сколько часов в неделю я учу английский язык? А сколько часов я смотрю сериалы? Что мне полезнее для того, чего я хочу? Получается, что я опять “смотрю сериалы на встречу своему будущему”))

Если знаешь, что хуже работаешь, когда мало спишь и с перепоя, то зачем мало спишь и пьешь? Ты хочешь плохо делать работу?

2/ Пробуждение начинается тогда, когда ты начинаешь замечать, что начинаешь замечать.
Тут как-то даже нечего особо добавить.

3/ Истинные знания преумножают скорбь.
Есть много версий этой мысли. И еще интересное следствие этого и первого наблюдения. В итоге любое реально серьезное знание это знание про самого себя. Новое знание (если оно реально истинное) серьезно меняет собственную картину мира, представление о себе, своих ценностях, своих характеристиках, характере. Это обычно реально очень печально и больно.

4/ Ошибаться это часть процесса.
Постоянно себе это повторяю. Но это очень тяжело. Буквально сегодня смотрел очередное видео с Маском. Он там говорит, что позитивное отношение к ошибкам, которое сейчас в моде в Силиконовой долине, ему не особо близко. Ему гораздо больше нравится делать выводы из своих успехов. Зато эта тема с “fail fast, fail often” и похожие позитивно работают на общее количество попыток что-то сделать.

5/ Действия, поступки, конкретные дела имеют значение.
Остальное не имеет значение. Я это не мои мысли. Не мои сомнения, боли, радости, вещи, деньги. Я — это то, что я делаю.
Тот редкий случай, когда я не согласен с Куртом Воннегутом с его “I am a human being, not a human doing”.

6/ Редактировать и делать заново.
Очень много вещей просто невозможно сделать хорошо с первого раза. Отличный способ сделать всю задачу — это сначала сделать её полностью но не с большой степенью проработки, а потом улучшать и переделывать. При этом в финальной версии от изначальной может ничего не остаться.

7/ Лучше стыдно, чем никогда.
Чтобы сделать такие вещи хорошо их сначала нужно сделать много раз плохо. Не нужно бояться делать плохо. Если с самого начала не ставишь себе ограничение “делать хорошо”, то можно ставить себе критерий “делать плохо”. С таким подходом ты, конечно, гораздо чаще делаешь плохо, совершаешь ошибки, чувствуешь себя дураком, но гораздо быстрее приближаешься к “хорошо”, чем если бы старался каждый шаг, каждое действие сделать хорошо.

8/ Мир, общество вокруг нас сделан людьми, которые не умнее нас.
То, что мы родились и выросли в таком окружении, в каком выросли не делает эту среду правильной. Просто мы родились и выросли в таком окружении. А вот эти все аспекты реальности, в которой мы живем: государства, деньги, транспортная системы, нормы питания, общения людей, образовательная система, индустрия развлечений и так далее, и так далее, и так далее — это все порождение и результат деятельности таких же людей, как мы с вами. Людей, которые не умнее, не лучше, чем мы. Просто они жили раньше и почему-то решили, что вот так оно будет. А может быть ничего такого они и не решали, просто так вышло.

9/ 99,99% всего в мире не имеет значения.
Вот только очень сложно узнать, что имеет значение для тебя лично. Потом сложно уделять время тому, что важно тебе, а не тому, чему уделяют время люди вокруг.

10/ Можно менять все. Лучшее место, с которого можно начать, ты сам.
Я всегда ношу телефон в правом кармане, а бумажник в левом. Пару месяцев назад я решил, что начну пробовать изменить эту привычку. Это такой мини-тренинг по изменения. Оказалось, что даже привыкнуть засовывать их в в противоположные карманы это тяжело. Менять привычки очень тяжело. Менять мир очень тяжело. Сначала надо научиться менять самого себя.

11/ Ограничения это хорошо
Они позволяют быстрее начинать делать. Если не получается начать что-то делать, не понятно, как подступить к задаче, ну получается эту саму задачу сформулировать, то могут помочь даже придуманные, исскуственные ограничения.

12/ Разрушение это часть творчества.
Творчество (в очень широком смысле этого слова) это, наверное, самое крутое (интересное, увлекательное, яркое, свежее), что может делать человек. Для того, чтобы создавать

13/ Осторожность с мнениями, убеждениями и фактами.
Я вырос в таком обществе, в котором у меня в голове сформировалось много разных мнений, предубеждений, точек зрения на то, что правильно, а что нет, что хорошо и что плохо, как можно и нельзя делать, что работает в каких ситуациях… Страшно представить столько вот этого всего у меня в голове. А еще страшно представить сколько того, что я считаю фактом, на самом деле, является убеждением. И из вот этого всего у меня в голове, честно говоря, каша. Нужно держать себя в тонусе, чтобы давать себе отчет в том, с чем конкретно я сейчас имею дело.

14/ Человек совсем не обязательно венец творения.
Вообще не факт, что мы являемся чем-то особенным. У нас очень ограниченные рецепторы, органы. Нам не дано понять, почувствовать абсолютно большую часть того, что происходит не то, что во Вселенной или нашей Солнечной системе, а вообще на нашей крохотной планете, в нашей квартире.

“If you ever start taking things too seriously, just remember that we are talking monkeys on an organic spaceship flying through the universe.” Joe Rogan

15/ Ошибки, травматичный опыт.
Вот они реально полезны для роста и развития. А успех не так уж и полезен, его очень сложно рефлексировать.

Ошибки, провалы, неточности, травмы — неотъемлимая часть успехов и достижений. Когда планируешь какой-то проект, то хорошо писать список вещей, которые в этом проекте могут пойти не так, и еще лучше, конечно, придумывать варианты решения этих проблем.

Постоянное стремление многих людей, чтобы было комфортно, удобно это какой-то не природный эскапизм.

16/ Выходить за рамки, границы, пределы возможного для себя
Вот это единственный путь, чтобы развиваться. Вполне естественно, что в процессе выхода за пределы, ты постоянно терпишь неудачи. Зато потом начинаешь повышать по-немного планку. И уже через какое-то время то, что недавно было пределом, становится новой нормой. А то, что для нас является нормой, определеят нас как людей. Ежедневные дела влияют на жизнь гораздо больше, чем то, что делаешь раз в год или месяц.

17/ Счастье это не цель.
Счастье это побочный эффект, который возникает, когда делаешь правильно. А может быть все и не так. Может быть счастье это нормальное природное состояние человека, и не надо ничего делать, чтобы быть счастливым, достаточно просто быть человеком. Но у меня получается замечать счастье только, когда в моей жизни есть какое-то активное дело.

18/ Чем проще инструменты, тем лучше они работают, тем меньше шансов, что они поломаются
Добавлю только то, что человек это обезьяна, которая отличается от других обезьян совсем немногим. У нас есть сознание, абстрактное мышление и, что самое важно для меня, стремление делать разные инструменты. В английской версии, как часто бывает, это звучит лучше: Human are naturally-born tool-makers.
Понятно, что инструменты эти не всегда физически существуют.

19/ Постоянство изменений это единственное постоянство, которое у нас есть.
Адаптивность. Скорость изменений, адаптации к меняющейся среде сделали человека современным человеком. И тут ключевой момент не в том, какие правильные изменения мы сделали. А в том какое гигантское количество попыток мы предприняли.

Лучшее, чему мы можем учить себя — учиться адаптироваться к изменениям, изменять себя, свои привычки.

20 /Делать прототипы, чтобы объяснять идеи.
Почти всегда, когда у тебя в голове есть идея, то она вся такая из себя классная. А когда пытаешься объяснить её другому человеку, то он не так её понимает. Чтобы другие люди понимали твои идеи, мысли надо делать их осязаемыми.

21/ Эмоции, ощущения очень сильно недооцениваются.
Связь мысли, ощущений, эмоций — вот, что действительно влияет на человека. Если это только мысль, идея прочитанная в книге, услышанная на конференции или увиденная в кино, то она практически наверняка не окажет никакого важного влияния. Если же эта идея прожита, осознана, прочвуствована на всех или хотя бы на нескольких уровнях (интеллектуальном, эмоциональном, духовном) то у нее есть шансы что-то действительно изменить.

22/ Личная ответственность.
Я в ответе за свою жизнь. Никто другой не в ответе за мою жизнь.

Ты сам можешь выбирать в каком мире ты живешь.

Для меня хорошо работает аналогия с кино. Просто надо помнить (или придумывать) в каком фильме какого режиссера ты сейчас находишься, как, что ты сейчас делаешь, выглядит со стороны, как оно может быть показано на большой экране. Надо бы не забывать, что я все время на большом экране свое жизни.

23/ Дисциплина = свобода = любовь.
Как-то так.

24/ Всегда всё сводится к взаимодействию людей с людьми.
По крайней мере, сейчас. Посмотрим, что и как будет происходить с развитием и внедрением искусственного интеллекта и прочих прелестей.

25/ Осознанность.
Я несколько раз в своей жизни очень четко понимал-ощущал, что я не понимаю, почему-зачем я делаю то, что я делаю. Я понял, что абсолютное большинство людей, и я в том числе, делают то, что делают все вокруг. Почему? Потому что все так делают. Потому что все так делали раньше. Потому что здесь так принято. Так вот — это фигня. Так делать значит плыть по течению. Плыть по течению это не то, что интересно.

Мы очень часто принимаем решения даже не понимая, что мы приняли какое-то решение. Мы просыпаемся утром, завтракаем, едем на работу, в метро нам наступают на ногу, пинают локтем и даже не извиняются. И вот мы пол-дня, а то и целый день почему-то нервные, злые и рассказываем коллегам в какому нездоров окружении мы живем и какие люди вокруг сволочи и идиоты. Вот мы приняли решение быть человеком, на которого влияют другие люди, который злится и жалуются. Такие дни происходят снова и снова. И вот мы уже с самого утра готовы брюзжать. Только вот что-то не помним, когда приняли решение быть вредным, недовольным, жалующимся чуваком. А по факту бывает такое, что ведешь себя таким образом, будто принимал такое решение.

26/ Окружение, среда формирует нашс.
Формирует наши привычки, способы думать, ощущать мир. Мы этого не замечаем, но это происходит постоянно.

Если бы я вырос в Китае, то мне было странно и необычно устройство всего в Украине. Оно и так, конечно, странно, но было бы точно страннее.

Если еще вспомнить про личную ответственность, то получается, что мы в ответе за наше окружение, а не наше окружение несет ответственность за нас.

27/ Системы могут быть эффективными и живыми/жизнеспособными, только если они открытые.
Нельзя сделать что-то, что будет хорошо и долго работать, если это что-то не будет сообщаться с окружающим миром.

28/ Взаимодействие с другими объектами определяет свойства объекта
Примерно как в истории с утиным тестом. Если нечто выглядит как утка, плавает как утка и крякает как утка, то это, вероятно, утка и есть. Так и со всем, чем мы сталкиваемся в жизни. Интереснее не как это что-то устроено, сколько то, как с этим чем-то можно взаимодействовать, какой эффект оно оказывает.

29/ Культура — это привычки общества.
А люди это социальные животные. Живем мы в обществе. И эта самая культура, которая просто таки везде и всюду вокруг нас, формирует наши привычки. Самое страшное, что она формирует наше представление о том, что такое нормально.

30/ Государства — зло.
Демократия худшая форма организации, но ничего лучше мы пока не научились внедрять. Придумали уже кучу всего, но реализовывать в жизни пока не научились. Пока.

Основная функция и нулевой (может даже минус первый) приоритет государства — сохранение государства.

31/ Капитализм — зло.
Такое же зло, как и государства. Государственное устройство все нашей планеты и капитализм (как минимум, его современное воплощение) вот штуки, которые, как мне кажется, должны стать первыми жертвами какой-то следующей мировой революции.

32/ Ограниченность личного опыта и знаний
В мире уже давным-давно столько информации, полезной и бесполезной, интересной и скучной, жизненно-необходимой и смертельно опасной, что у человека нет шанса эту информацию изучить и сделать какие-то полезные для себя выводы. Множество вещей, который происходят в мире и серьезнейшим образом влияют на него и даже на наши простые ежедневные действия

33/ Прошлого не существуют, есть только здесь-и-сейчас и будущее.
Нужно концентрироваться на вещах, на которые действительно можешь повлиять. Есть только один день жизни, на который ты действительно можешь влиять, в который ты можешь что-то сделать. Этот день — сегодня.

34/ Начинать быстро.
Если появилась какая-то реально крутая идея, то надо сразу начинать её реализовывать. Сделать хоть, что-то в этом направлении. Чем быстрее, тем лучше. И часто вдруг начинает происходить какая-то странная магия.

Отлично начинать с того, чтобы записывать, собственно, идею. Вот так вот словами на бумаге или в редакторе на компьютере. Часто в этот момент, конечно, оказывается, что это вовсе не идея, так как не получается её даже внятно сформулировать. А если ты не можешь описать идею, то как вовлекать в реализацию идеи других людей?

35/ Those people who are crazy enough to think they can change the world are the ones that actually do
Нужно быть сумасшедшим, чтобы менять мир. Чтобы быть сумасшедшим нужно менять себя.

36/ Третья мировая война будет до 2050 года.
А даже, если её и не будет, то лучше к ней готовиться. Это опять таки вопрос личной ответственности за себя, свое здоровье, жизнь. Если войны не будет, то умения и навыки, полученные в процессе подготовки, очень даже пригодятся.

37/ Следующая человеческая цивилизация должна быть технологической.
Если она не будет технологической, то её не будет.

Фууух. Вроде все. Самое важное, вроде, написал.

ps:
Буду писать и дальше на разные разнообразные темы, которые будут где-то вокруг всего того, что сверху. Надеюсь, что у меня хватит сил, чтобы следующие статьи были не столько про выводы, сколько про то, как у меня происходит внедрения их в практику.

32 вывода к 32 годам

Бывают моменты, когда накапливается столько вопросов, что нужно каким-то образом дать им выход. Писатель, журналист, блоггер и путешественница Олеся Новикова делится своими жизненными выводами, к которым пришла в свои 32 года.

Публикуем для вас эти удивительно простые и мудрые мыслями, которые, как нам кажется, подходят для любого возраста:

Страшно всем.

И красивым, и талантливым, и умным, и везучим. Начинать новое. Выходить из привычного круга. Рисковать. Делать что-то, к чему еще не привык. Страшно за близких. За дело. За свою жизнь, если прижмет. И много чего еще. Страх будет и дальше. Сколько бы ни было опыта, практики, уверенности, признания, денег, таланта, но каждый раз замахиваясь на новую высоту, каждый раз выходя на сцену, каждый раз, оборачиваясь на близких — в той или иной степени будет страх. Это нормально. Это значит, что ты еще жив. И значит, нужно идти вперед. Через страх. А не пытаться полностью от него избавиться.

Жизни без перемен не существует.

Стабильность иллюзорна. Мы постоянно находимся в движении. Мы постоянно меняемся внешне и внутреннее, эти процессы не прекращаются ни на секунду. И секунды, как меры измерения, здесь даже много. Процессы идут каждое мгновение. Это множество секунд. Вопрос: «Меняться или не меняться?» у здравомыслящего человека стоять не может. Только: «Имею ли я отношение к этим изменениям и в какой мере?»

Быстро — это медленно, но без перерыва.

Не нужно быстро, интенсивно, круто, очень мощно. Достаточно всего лишь регулярно. Самое главное — держать ритм. По чуть-чуть, но со стабильной последовательностью. А через какое-то время, со стороны, это будет выглядеть, как быстро, интенсивно, круто и очень мощно.

Создавать больше, чем потреблять.

Иначе, все. Беспросветная жизнь потребителя, витиевато сплетающаяся в многозначительный вывод: «Все хорошо, но ничего хорошего». Человек должен что-то делать. Добровольно и любя. Это формула его душевного здоровья. А бонусом, что любопытно — это единственный способ получать удовольствие от потребления, которое не будет его разрушать. Можно считать этот процесс — здоровым психическим метаболизмом.

Сегодня — это то, что ты делал и думал вчера, а завтра — это то, что ты делаешь и думаешь сегодня.

Эту фразу нужно повторять, как мантру до тех пор, пока не дойдет, что твои родители не имеют отношения к твоим взрослым проблемам. Во всяком случае, они не виноваты, что некому сменить пластинку в твоей голове, которая заела с детства.

Никаких гарантий нет.

Базовое правило мироздания, через которое нужно пропускать все свои решения и планы.

Эпоха сокровенных знаний, которые могут что-то изменить, закончена.

Настала эра информационной гигиены. Уже лет пять, как знания не являются главной валютой в вопросе достижений и какого-либо осмысленного существования. Интернет их обесценил своей доступностью. На смену пришла концентрация. Способность удерживать внимание на задаче и не расплескивать интерес — вот кто правит. А этот навык находится в прямой зависимости от информационного шума, который сегодня повсюду. Чем больше словесного мусора вокруг — тем слабее фокус. Чем больше чужих мыслей, тем тише собственный голос. Постоянное нахождение в интернет-потоке атрофирует способность к самоосознанию, подменяя суть концепциями о том, что ею является.

Радость и удовольствие — не одно и то же.

Мы никогда не получаем радости от шоколадного торта, фужера вина или сигаретки. Мы не получаем радости от новых сапог или духов. Важно называть вещи своими именами — мы получаем удовольствие. А тут уже совсем другая химия. Природа этого чувства очень скоротечна и неразрывно связана с последующей неудовлетворенностью, скукой, пресыщенностью и желанием новой порции. Не страшно отказать себе в удовольствиях, страшно не познать радость.

Страдания существуют.

Будда был все-таки прав. Страдания существуют. Страдают все. И те, у кого ничего нет, и те, у кого есть все. А кто конкретно в эту минуту не страдает, уйдет в боль в следующую, как только изменится курс доллара, произойдет теракт, получит в ответ, что его не любят, увидит грязный подъезд, не дождется ответа на сообщение, не получит денег или по любому другому дуновению ветерка. Страдания существуют. И всегда без повода, если вспомнить финал любого человеческого существа.

Быть счастливыми могут не все.

Каждый ли человек может быть счастливым? Да, разумеется! Но это в теории. На практике стабильно счастливыми, то есть спокойными, уравновешенными, благостными, если хотите, могут быть только те, кому доступна дисциплина ума. Чей ум способен (натренирован) не дергаться по всем многочисленным поводам, которые его окружают. Кто может оставаться в равновесии радости не только в штиль, но и в порыве неприятных ситуаций. В противном случае, все бесконечные поводы от царапины на твоем авто будут выкидывать тебя в боль, раздражение и тревогу. И это всего лишь какая-то машина, а есть же ситуации и посерьезнее. Счастливым такой загнанный ум, реагирующий на любое происшествие, можно назвать лишь в статусе Инстаграма.

Радость — это равновесие ума.

Скажите мне это лет так 5 назад, я бы покрутила у виска. Когда тебе днем и ночью мечтается большая светлая любовь, дружная семья, интересное доходное дело, возможность работать на себя, а не на другого, насыщенная путешествиями жизнь, кажется, что, все-таки, ты имеешь какие-то представления о радости, как минимум, о собственной. Да, ты сейчас во многом не удовлетворен, да что-то может вывести тебя из себя, да ты страдаешь. Так это и понятно. Но ты знаешь к чему стремиться. Ты знаешь, где твоя осязаемая непреходящая радость, заглядываясь на свои, столь манящие, мечты. Радость — это состояние полного равновесного покоя ума, которое достигается при освобождении от слепых (автоматических) реакций этого самого ума. Здоровый, возможно единственный, способ познать (и развивать) такое состояние во взрослом возрасте — это глубокая медитация наблюдения.

Фрукты — не кислотная, а щелочная еда.

Если по-научному, свежие спелые фрукты и почти все овощи вызывают в организме щелочную реакцию и помогают нейтрализовать избыток кислоты в нем, а крахмал, сахар, мясопродукты, жиры, масла, молочная продукция, наоборот, организм закисляют. Полное описание есть в таблице Н. Уокера и Р. Поупа, которая доступна через гугл.

«Мое тело само знает, что ему лучше» — одна из самых коварных ловушек ума.

Тело алкоголика хочет выпить, тело курильщика мечтает о сигаретке, наше тело жаждет шоколада и картошки-фри. О каком «лучше знает» все говорят? Также, как и ум живет автоматическими реакциями, не давая человеку делать элементарные подвижки в своей жизни, так и тело подчиняется привычкам и хаотичным импульсам вожделения.

Питание влияет не только на наше тело, но и на наше сознание.

Подобно алкоголю, который заметно изменяет наше сознание, притупляя его, некоторые продукты несут схожий эффект, но в менее выраженной и зачастую неосознаваемой форме. Еда может замедлять и расфокусировать голову, ослабляя контроль, силу осознанности и ясность восприятия. Слегка «затуманенное» состояние становится уровнем нормы, позволяя человеку забыть, что значит легкость и ясность на самом деле. Наиболее «свободная» еда — это свежие овощи и фрукты, а также растительная пища и злаки, приготовленные простым способом с минимальным содержанием масла, приправ и соли.

Денег нужно столько, чтобы о них не думать.

Деньги не решают главный вопрос человечества — они не делают своего владельца счастливым. Но возможность о них не думать, как минимум в быту, существенно высвобождает энергию для других процессов.

Мы все одинаковые намного больше, чем разные.

Значение личной уникальности сильно преувеличенно и не дает нам быстро решать свои проблемы. Все ответы и решения давно существуют, а зацикленность на собственной неповторимости не дает человеку задвинуть свое эго туда, где ему было бы полезно всегда находиться и без помех воспринимать окружающую его реальность со всеми ответами и подсказками.

Зависимость лечится только 100% отказом.

Нельзя выпить один фужер вина, если ты алкоголик. Нельзя иногда курить, если пытаешься бросить. Тебя будет скручивать постоянно. Взлеты и падения. Срывы. В вопросах психоэнергетических «крючков» нет полутонов. И это правило незыблемо для зависимостей всех типов.

Состояния внутренней 100% готовности к переменам не существует.

Мы всегда до конца не готовы к поворотам и изменениям. Всегда есть веские «но» и поводы немного отложить до более благоприятной ситуации. Бесполезно ждать однозначного внутреннего согласия, нужно решаться, опираясь скорее на «пора», чем на эфемерную готовность.

Жизнь — это книга, первые главы которой были написаны не тобой.

Да, и последующие — тоже, чаще всего. Мы состоим из убеждений и моделей окружающего нас мира, а мир этот — не абстрактная планета Земля, а вполне конкретный подъезд, офис, дом — место, где мы проводим время. Это друзья, коллеги, родители, продавцы в магазине, с которыми сталкиваешься каждый вечер. Это лента в социальных сетях и так называемые друзья из фейсбука. Мы впитываем взгляды, позиции, точки зрения просто автоматически, мы вдыхаем их с воздухом и становимся такими же или наоборот противоположными, что тоже автоматический момент отрицания. В детстве этот процесс полностью неуправляем. Суть нашей личности собирали другие люди и осознанный родительский вклад (если он вообще был) там далеко не преобладает. То, что мы считаем собой и то, что надо бояться потерять по версии некоторых психологов, — всего лишь в той или иной степени красоты мозаики от нашего окружения. Терять нечего. По-моему, отличная новость. Можно перекроить все в какую угодно сторону.

Результат — это количество попыток.

А не один меткий выстрел. И уж точно не удача при долгосрочной перспективе.

То, что тебе помогало на одном этапе может оказаться тормозом для выхода на следующий.

Способность к кардинальным переменам характеризуется возможностью отказываться. Но не только от того, что тебе мешает. Порой очень важно отказаться от того, что тебе помогало в прошлом. Простой пример: правила малого бизнеса не работают в среднем. Расти без отказа от части из них, пусть даже они поднимали процесс вчера, — невозможно. Тоже и с человеческой личностью — ее установками, планами.

За зоной комфорта находится зона дискомфорта.

А не коробка шоколадных конфет.

Жизни без цели не существует.

Также, как и состояния без перемен. Вопрос лишь в том: ставишь ли ты эти цели сам или отдаешь на откуп инстинктам (неосознанным целям).

Лени — не существует.

Есть нелюбимые занятия, нехватка энергии и отсутствие масштабного видения, чтобы захватывало дух от открывающихся перспектив. А лени нет.

Себя невозможно найти, себя можно только создать.

Искать нечего и некого. Ты всегда есть здесь и сейчас. А твой путь — это то, что у тебя под ногами в данную конкретную секунду, не более того. Тот самый «свой» путь отличается от того, чем он не является только фактом осознанности идущего, который прокладывает пусть и небольшие, но вполне осязаемые цели. Когда эти цели определяют другие люди или они прорастают хаотично через слово «должен» — никакого пути нет, есть набор разношерстных неприкаянных эпизодов.

Алкоголь не нужен.

Вообще.

Нереализованный потенциал причиняет боль. И бесполезно прятаться от этого факта в выбранный уровень комфорта или красивые философские концепции, те же истории про женственность, материнство и прочее. За каждый талант с нас спросится.

Банки должны платить тебе, а не ты им.

Это единственно возможное финансовое здоровье. Никогда никогда никогда не стоит покупать то, на что не заработал. Никогда. Во всяком случае, если грезишь о серьезных переменах. Мы платим банку не только деньгами, но и своей свободной энергией. Пространства для риска и авантюрных подвижек практически не остается. Прорыв из такого состояния (особенно на новый финансовый уровень) вряд ли возможен.

Две способности, которыми нужно овладеть, как можно раньше: умение напрягаться и умение расслабляться.

Любое движение требует напряжения сил в тот или иной момент. Если идти на него нехотя, по нужде — будет расходоваться в два раза больше энергии. Часть на само усилие, остальное — на психическое напряжение. На внутреннюю борьбу. Отсюда необходимость научиться напрягаться по желанию, полюбить свое усилие. При способности напрягаться добровольно, видя в этом исключительно положительный аспект, количество потраченных сил сократится в разы. Будет получаться больше и легче. А умение расслабляться — принимать реальность такой какая она есть, отпускать собственные ожидания, развязывая внутренние узлы и снимая телесное напряжение — второе крыло, без которого на одном напряжении далеко не продвинешься.

Два ответа, которым нужно научиться, как можно раньше: «Да» и «Нет».

Говорить «Да» ситуациям и людям несмотря на отсутствие гарантий, полной внутренней готовности и различные внешние обстоятельства. И говорить «Нет» в первую очередь самому себе — своим слабостям, страхам и внутренней распущенности. И лишь далеко потом — другим людям.

Крутые штуки отличаются от хороших способностью делающего забывать себя.

Творец отличается от человека, который что-то неплохо делает тем, что ставит дело выше себя, растворяя в процессе свое эго. И делает это осознанно и любя, а не по отсутствию выбора или чувству долга. Так один маркетолог может быть истинным музыкантом в профессии, а иной музыкант так на всю жизнь и остается тем, кто имеет дело с музыкой.

Каждый встреченный на пути знак всегда имеет минимум 3 толкования.

1. Может быть это действительно знак! 2. Может быть ты бредишь и притягиваешь факты за уши. 3. А может быть это испытание — явление противоположное знаку — попытка отвести от выбранного пути, как проверка искренности твоего решения и силы намерения.

источник

Если вам понравился пост, пожалуйста, поделитесь ими со своими друзьями! 🙂

32 вывода к 32 годам | Golbis

Женщина на миллион

Три принципа, на которых не надо строить семью

Замечательное послание Стивена Хокинга для всех, кто переживает темные времена

Исследование: мозг ребенка реагирует на шлепки так же, как и на жестокие формы насилия

Как работает проклятие – никакой мистики!

Эксперимент «Третья волна» был проведен калифорнийским учителем истории Роном Джонсом

7 реальных признаков интеллекта, которые нельзя подделать

Как вырастить гения: 7 правил еврейских родителей

Мне 7 лет. Я стою у доски…

РЯБЧИКИ с АНАНАСАМИ

Когда любишь по-настоящему

Ученый из Оксфорда подтверждает: начало учебы и рабочего дня раньше 10 часов утра — пытка

Красивая и умная Саломея Сванадзе

Лабковский: Верный способ вырастить не мальчика, а гея!

Семь типов токсичных матерей, оставляющих уродливые шрамы на душах своих детей

Обратите внимание на то, как люди относятся к вам: это отражение того, кто они на самом деле

Михаил Лабковский – о том, как выйти из роли жертвы и что делать в отношениях с агрессором

Лабковский: «Выигрывает не тот, кто все время суетится, а тот, кто спокоен и умеет концентрироваться»

Главный грех мужчины

Богатыми вас сделает не работа, а эти 5 вещей

32 вывода к 32 годам

День рождения, плавно перетекающий в Новый год, — неизменный период для подведения итогов. Я не обязываю себя ставить цели или как-то специально искать ответы. Просто накануне 5 ноября всегда появляются вопросы. А к Новому году они заполняют все внутреннее пространство, грозя прорваться наружу первым подвернувшимся способом, если я не предоставлю для них какой-нибудь выход. В этом году я решила снабдить этот процесс некоторыми жизненными выводами. И вот что получилось.

32 вывода к 32 годам

1. Страшно всем

И тем, кто финансово независим. И тем, кто талантлив. И тем, кто безоговорочно хорош собой. И тем, кто умен и по-житейски подкован. И тем, кто родился в счастливой полной семье. И тем, кто живет у океана. И молодым. И старым. И тем, кто признан в своем деле. И тем, у кого понимающий партнер. И тем, кто занимается йогой. И единоборствами. И медитацией. И тем, кто только начинает. И тем, у кого большой опыт. И тем, у кого с виду абсолютно все хорошо.

Страшно всем.

Начинать новое. Выходить из привычного круга. Рисковать. Делать что-то, к чему еще не привык. Страшно за близких. За дело. За свою жизнь, если прижмет. И много чего еще.

Страх будет и дальше. Сколько бы ни было опыта, практики, уверенности, признания, денег, таланта, но каждый раз, замахиваясь на новую высоту, каждый раз, выходя на сцену, каждый раз, оборачиваясь на близких – в той или иной степени будет страх. Это нормально. Это значит, что ты еще жив. И значит, нужно идти вперед. Через страх. А не пытаться полностью от него избавиться.

2. Жизни без перемен не существует

Стабильность иллюзорна. Состояние «плато» абсурдно. Мы постоянно находимся в движении. Но это, конечно, толерантная банальность, потому что на деле мы постоянно стареем. И можно сказать еще жестче, но это уже вотчина Пелевина. Не полезу.

Мы постоянно меняемся внешне и внутреннее, эти процессы не прекращаются ни на секунду. И секунды как меры измерения здесь даже много. Процессы идут каждое мгновение. Это множество секунд. Вопрос: «Меняться или не меняться?» у здравомыслящего человека стоять не может. Только: «Имею ли я отношение к этим изменениям и в какой мере?»

3. Быстро – это медленно, но без перерыва

Словами японского фольклора.

Не нужно быстро, интенсивно, круто, очень мощно. Достаточно всего лишь регулярно. Самое главное – держать ритм. По чуть-чуть, но со стабильной последовательностью. А через какое-то время со стороны это будет выглядеть, как быстро, интенсивно, круто и очень мощно.

4. Создавать больше, чем потреблять

Иначе все. Беспросветная жизнь потребителя витиевато сплетающаяся в многозначительный вывод: «Все хорошо, но ничего хорошего».

Человек должен что-то делать. Добровольно и любя. Это формула его душевного здоровья. А бонусом, что любопытно, это единственный способ получать удовольствие от потребления, которое не будет его разрушать. Можно считать этот процесс здоровым психическим метаболизмом.

5. Сегодня – это то, что ты делал и думал вчера, а завтра – это то, что ты делаешь и думаешь сегодня

Тем, кто все поймет про родителей и прошлое как таковое, имеет смысл продолжать повторять, пока не накроет, что причины неудач не имеют такого большого значения, как принято считать, и вопрос: «Почему?» сам по себе не особо-то и ценен, зато тянет энергию по полной программе. Изменить свои действия сегодня можно и вовсе без ответов.

6. Никаких гарантий нет

Базовое правило мироздания, через которое нужно пропускать все свои решения и планы.

7. Эпоха сокровенных знаний, которые могут что-то изменить, закончена. Настала эра информационной гигиены

Уже лет пять, как знания не являются главной валютой в вопросе достижений и какого-либо осмысленного существования. Интернет их обесценил своей доступностью. На смену пришла концентрация. Способность удерживать внимание на задаче и не расплескивать интерес – вот кто правит. А этот навык находится в прямой зависимости от информационного шума, который сегодня повсюду. Чем больше словесного мусора вокруг – тем слабее фокус. Чем больше чужих мыслей, тем тише собственный голос. Постоянное нахождение в интернет-потоке атрофирует способность к самоосознанию, подменяя суть концепциями о том, что ею является.

8. Радость и удовольствие — не одно и то же

Не страшно отказать себе в удовольствиях, страшно не познать радость

9. Страдания существуют

10. Быть счастливыми могут не все

Это удивительно простая вещь, которую я так долго отказывалась видеть. Слишком сильна в нас вера в чудо на счастливый финал по случаю собственной непревзойденной уникальности. Но каждый ли человек может пробежать 42-километровый беговой марафон? В теории – да, человеческие ресурсы способны на это, но на практике – это доступно только натренированному человеку.

Конечно, нетренированный может натренироваться. Но цепочка удлиняется, и ее важно увидеть. Прямо сейчас неподготовленный человек на это не способен.

Каждый ли человек может быть счастливым? Да, разумеется! Но это в теории. На практике стабильно счастливыми, то есть спокойными, уравновешенными, благостными, если хотите, могут быть только те, кому доступна дисциплина ума. Чей ум способен (натренирован) не дергаться по всем многочисленным поводам, которые его окружают. Кто может оставаться в равновесии радости не только в штиль, но и в порыве неприятных ситуаций. В противном случае все бесконечные поводы от царапины на твоем авто будут выкидывать тебя в боль, раздражение и тревогу. И это всего лишь какая-то машина, а есть же ситуации и посерьезнее. Это самсара, детка. Счастливым такой загнанный ум, реагирующий на любое происшествие, можно назвать лишь в статусе Инстаграма.

11. Радость – это равновесие ума

…

Радость — это состояние полного равновесного покоя ума, которое достигается при освобождении от слепых (автоматических) реакций этого самого ума. Здоровый, возможно, единственный способ познать (и развивать) такое состояние во взрослом возрасте – это глубокая медитация наблюдения.

12. Фрукты – не кислотная, а щелочная еда

13. «Мое тело само знает, что ему лучше» — одна из самых коварных ловушек ума

Тело алкоголика хочет выпить, тело курильщика мечтает о сигаретке, наше тело жаждет шоколада и картошки-фри. О каком «лучше знает» все говорят? Так же, как ум живет автоматическими реакциями, не давая человеку делать элементарные подвижки в своей жизни, так и тело подчиняется привычкам и хаотичным импульсам вожделения.

14. Питание влияет не только на наше тело, но и на наше сознание

Подобно алкоголю, который заметно изменяет наше сознание, притупляя его, некоторые продукты несут схожий эффект, но в менее выраженной и зачастую неосознаваемой форме. Еда может замедлять и расфокусировать голову, ослабляя контроль, силу осознанности и ясность восприятия. Слегка «затуманенное» состояние становится уровнем нормы, позволяя человеку забыть, что значит легкость и ясность на самом деле. Наиболее «свободная» еда – это свежие овощи и фрукты, а также растительная пища и злаки, приготовленные простым способом с минимальным содержанием масла, приправ и соли.

15. Денег нужно столько, чтобы о них не думать

16. Мы все одинаковые намного больше, чем разные

17. Зависимость лечится только 100-процентным отказом

18. Состояния внутренней 100-процентной готовности к переменам не существует

19. Жизнь – это книга, первые главы которой были написаны не тобой

Да, и последующие – тоже, чаще всего.

Мы состоим из убеждений и моделей окружающего нас мира, а мир этот – не абстрактная планета Земля, а вполне конкретный подъезд, офис, дом – место, где мы проводим время. Это друзья, коллеги, родители, продавцы в магазине, с которыми сталкиваешься каждый вечер. Это лента в социальных сетях и так называемые друзья из фейсбука. Мы впитываем взгляды, позиции, точки зрения просто автоматически, мы вдыхаем их с воздухом и становимся такими же или наоборот, противоположными, что тоже автоматический момент отрицания. В детстве этот процесс полностью неуправляем. Суть нашей личности собирали другие люди, и осознанный родительский вклад (если он вообще был) там далеко не преобладает. То, что мы считаем собой, и то, что надо бояться потерять по версии некоторых психологов, всего лишь в той или иной степени красоты мозаики от нашего окружения. Терять нечего. По-моему, отличная новость. Можно перекроить все в какую угодно сторону.

20. Результат – это количество попыток

А не один меткий выстрел. И уж точно не удача при долгосрочной перспективе.

21. То, что тебе помогало на одном этапе, может оказаться тормозом для выхода на следующий

Способность к кардинальным переменам характеризуется возможностью отказываться. Но не только от того, что тебе мешает. Порой очень важно отказаться от того, что тебе помогало в прошлом. Простой пример: правила малого бизнеса не работают в среднем. Расти без отказа от части из них, пусть даже они поднимали процесс вчера, невозможно. Тоже и с человеческой личностью – ее установками, планами.

22. За зоной комфорта находится зона дискомфорта

А не коробка шоколадных конфет.

23. Жизни без цели не существует

Так же, как и состояния без перемен. Вопрос лишь в том: ставишь ли ты эти цели сам или отдаешь на откуп инстинктам (неосознанным целям).

24. Лени – не существует

25. Себя невозможно найти, себя можно только создать

Искать нечего и некого. Ты всегда есть здесь и сейчас. А твой путь – это то, что у тебя под ногами в данную конкретную секунду, не более того. Тот самый «свой» путь отличается от того, чем он не является только фактом осознанности идущего, который прокладывает пусть и небольшие, но вполне осязаемые цели. Когда эти цели определяют другие люди или они прорастают хаотично через слово «должен», никакого пути нет, есть набор разношерстных неприкаянных эпизодов.

26. Алкоголь не нужен

Вообще.

27. Нереализованный потенциал причиняет боль

И бесполезно прятаться от этого факта в выбранный уровень комфорта или красивые философские концепции, те же истории про женственность, материнство и прочее.

За каждый талант с нас спросится

28. Банки должны платить тебе, а не ты им. Это единственно возможное финансовое здоровье

Никогда-никогда-никогда не стоит покупать то, на что не заработал. Никогда. Во всяком случае, если грезишь о серьезных переменах. Мы платим банку не только деньгами, но и своей свободной энергией. Пространства для риска и авантюрных подвижек практически не остается. Прорыв из такого состояния (особенно на новый финансовый уровень) вряд ли возможен.

29. Две способности, которыми нужно овладеть как можно раньше: умение напрягаться и умение расслабляться

Любое движение требует напряжения сил в тот или иной момент. Если идти на него нехотя, по нужде – будет расходоваться в два раза больше энергии. Часть на само усилие, остальное – на психическое напряжение. На внутреннюю борьбу. Отсюда необходимость научиться напрягаться по желанию, полюбить свое усилие. При способности напрягаться добровольно, видя в этом исключительно положительный аспект, количество потраченных сил сократится в разы. Будет получаться больше и легче.

А умение расслабляться – принимать реальность такой какая она есть, отпускать собственные ожидания, развязывая внутренние узлы и снимая телесное напряжение через техники йоги и дыхания, например, — второе крыло, без которого на одном напряжении далеко не продвинешься.

30. Два ответа, которым нужно научиться как можно раньше: «Да» и «Нет».

Говорить «да» ситуациям и людям несмотря на отсутствие гарантий, полной внутренней готовности и различные внешние обстоятельства. И говорить «нет» в первую очередь самому себе – своим слабостям, страхам и внутренней распущенности. И лишь далеко потом – другим людям.

31. Крутые штуки отличаются от хороших способностью делающего забывать себя

Творец отличается от человека, который что-то неплохо делает тем, что ставит дело выше себя, растворяя в процессе свое эго. И делает это осознанно и любя, а не по отсутствию выбора или чувству долга. Так, один маркетолог может быть истинным музыкантом в профессии, а иной музыкант так на всю жизнь и остается тем, кто имеет дело с музыкой.

32. Каждый встреченный на пути знак всегда имеет минимум 3 толкования

1. Может быть, это действительно знак! 2. Может быть, ты бредишь и притягиваешь факты за уши. 3. А может быть — это испытание, — явление, противоположное знаку, попытка отвести от выбранного пути, как проверка искренности твоего решения и силы намерения.

Переменам быть и перемены есть. Спасибо, что читаете.

Автор-Олеся Власова

32 вывода к 32 годам — ОБРАЗ ЖИЗНИ|психология,отношения,общество|цитаты

Is Covid Pandemic Over?

32 вывода к 32 годам

1. Страшно всем. И красивым, и талантливым, и умным, и везучим. Начинать новое. Выходить из привычного круга. Рисковать. Делать что-то, к чему еще не привык. Страшно за близких. За дело. За свою жизнь, если прижмет. И много чего еще. Страх будет и дальше.
Сколько бы ни было опыта, практики, уверенности, признания, денег, таланта, но каждый раз замахиваясь на новую высоту, каждый раз выходя на сцену, каждый раз, оборачиваясь на близких — в той или иной степени будет страх. Это нормально. Это значит, что ты еще жив. И значит, нужно идти вперед. Через страх. А не пытаться полностью от него избавиться.

2. Жизни без перемен не существует. Стабильность иллюзорна. Мы постоянно находимся в движении. Мы постоянно меняемся внешне и внутреннее, эти процессы не прекращаются ни на секунду. И секунды, как меры измерения, здесь даже много. Процессы идут каждое мгновение. Это множество секунд. Вопрос: «Меняться или не меняться?» у здравомыслящего человека стоять не может. Только: «Имею ли я отношение к этим изменениям и в какой мере?»

3. Быстро — это медленно, но без перерыва. Не нужно быстро, интенсивно, круто, очень мощно. Достаточно всего лишь регулярно. Самое главное — держать ритм. По чуть-чуть, но со стабильной последовательностью. А через какое-то время, со стороны, это будет выглядеть, как быстро, интенсивно, круто и очень мощно.

4. Создавать больше, чем потреблять. Иначе, все. Беспросветная жизнь потребителя, витиевато сплетающаяся в многозначительный вывод: «Все хорошо, но ничего хорошего». Человек должен что-то делать. Добровольно и любя. Это формула его душевного здоровья. А бонусом, что любопытно — это единственный способ получать удовольствие от потребления, которое не будет его разрушать. Можно считать этот процесс — здоровым психическим метаболизмом.

5. Сегодня — это то, что ты делал и думал вчера, а завтра — это то, что ты делаешь и думаешь сегодня. Эту фразу нужно повторять, как мантру до тех пор, пока не дойдет, что твои родители не имеют отношения к твоим взрослым проблемам. Во всяком случае, они не виноваты, что некому сменить пластинку в твоей голове, которая заела с детства.

6. Никаких гарантий нет. Базовое правило мироздания, через которое нужно пропускать все свои решения и планы.

7. Эпоха сокровенных знаний, которые могут что-то изменить, закончена. Настала эра информационной гигиены. Уже лет пять, как знания не являются главной валютой в вопросе достижений и какого-либо осмысленного существования. Интернет их обесценил своей доступностью. На смену пришла концентрация. Способность удерживать внимание на задаче и не расплескивать интерес — вот кто правит. А этот навык находится в прямой зависимости от информационного шума, который сегодня повсюду. Чем больше словесного мусора вокруг — тем слабее фокус. Чем больше чужих мыслей, тем тише собственный голос. Постоянное нахождение в интернет-потоке атрофирует способность к самоосознанию, подменяя суть концепциями о том, что ею является.

8. Радость и удовольствие — не одно и то же. Мы никогда не получаем радости от шоколадного торта, фужера вина или сигаретки. Мы не получаем радости от новых сапог или духов. Важно называть вещи своими именами — мы получаем удовольствие. А тут уже совсем другая химия. Природа этого чувства очень скоротечна и неразрывно связана с последующей неудовлетворенностью, скукой, пресыщенностью и желанием новой порции. Не страшно отказать себе в удовольствиях, страшно не познать радость.

9. Страдания существуют. Будда был все-таки прав. Страдания существуют. Страдают все. И те, у кого ничего нет, и те, у кого есть все. А кто конкретно в эту минуту не страдает, уйдет в боль в следующую, как только изменится курс доллара, произойдет теракт, получит в ответ, что его не любят, увидит грязный подъезд, не дождется ответа на сообщение, не получит денег или по любому другому дуновению ветерка. Страдания существуют. И всегда без повода, если вспомнить финал любого человеческого существа.

10. Быть счастливыми могут не все. Каждый ли человек может быть счастливым? Да, разумеется! Но это в теории. На практике стабильно счастливыми, то есть спокойными, уравновешенными, благостными, если хотите, могут быть только те, кому доступна дисциплина ума. Чей ум способен (натренирован) не дергаться по всем многочисленным поводам, которые его окружают. Кто может оставаться в равновесии радости не только в штиль, но и в порыве неприятных ситуаций. В противном случае, все бесконечные поводы от царапины на твоем авто будут выкидывать тебя в боль, раздражение и тревогу. И это всего лишь какая-то машина, а есть же ситуации и посерьезнее. Счастливым такой загнанный ум, реагирующий на любое происшествие, можно назвать лишь в статусе Инстаграма.

11. Радость — это равновесие ума. Скажите мне это лет так 5 назад, я бы покрутила у виска. Когда тебе днем и ночью мечтается большая светлая любовь, дружная семья, интересное доходное дело, возможность работать на себя, а не на другого, насыщенная путешествиями жизнь, кажется, что, все-таки, ты имеешь какие-то представления о радости, как минимум, о собственной. Да, ты сейчас во многом не удовлетворен, да что-то может вывести тебя из себя, да ты страдаешь. Так это и понятно. Но ты знаешь к чему стремиться. Ты знаешь, где твоя осязаемая непреходящая радость, заглядываясь на свои, столь манящие, мечты. Радость — это состояние полного равновесного покоя ума, которое достигается при освобождении от слепых (автоматических) реакций этого самого ума. Здоровый, возможно единственный, способ познать (и развивать) такое состояние во взрослом возрасте — это глубокая медитация наблюдения.

12. Фрукты — не кислотная, а щелочная еда. Если по-научному, свежие спелые фрукты и почти все овощи вызывают в организме щелочную реакцию и помогают нейтрализовать избыток кислоты в нем, а крахмал, сахар, мясопродукты, жиры, масла, молочная продукция, наоборот, организм закисляют. Полное описание есть в таблице Н. Уокера и Р. Поупа, которая доступна через гугл.

13. «Мое тело само знает, что ему лучше» — одна из самых коварных ловушек ума. Тело алкоголика хочет выпить, тело курильщика мечтает о сигаретке, наше тело жаждет шоколада и картошки-фри. О каком «лучше знает» все говорят? Также, как и ум живет автоматическими реакциями, не давая человеку делать элементарные подвижки в своей жизни, так и тело подчиняется привычкам и хаотичным импульсам вожделения.

14. Питание влияет не только на наше тело, но и на наше сознание. Подобно алкоголю, который заметно изменяет наше сознание, притупляя его, некоторые продукты несут схожий эффект, но в менее выраженной и зачастую неосознаваемой форме. Еда может замедлять и расфокусировать голову, ослабляя контроль, силу осознанности и ясность восприятия. Слегка «затуманенное» состояние становится уровнем нормы, позволяя человеку забыть, что значит легкость и ясность на самом деле. Наиболее «свободная» еда — это свежие овощи и фрукты, а также растительная пища и злаки, приготовленные простым способом с минимальным содержанием масла, приправ и соли.

15. Денег нужно столько, чтобы о них не думать. Деньги не решают главный вопрос человечества — они не делают своего владельца счастливым. Но возможность о них не думать, как минимум в быту, существенно высвобождает энергию для других процессов.

16. Мы все одинаковые намного больше, чем разные. Значение личной уникальности сильно преувеличенно и не дает нам быстро решать свои проблемы. Все ответы и решения давно существуют, а зацикленность на собственной неповторимости не дает человеку задвинуть свое эго туда, где ему было бы полезно всегда находиться и без помех воспринимать окружающую его реальность со всеми ответами и подсказками.

17. Зависимость лечится только 100% отказом. Нельзя выпить один фужер вина, если ты алкоголик. Нельзя иногда курить, если пытаешься бросить. Тебя будет скручивать постоянно. Взлеты и падения. Срывы. В вопросах психоэнергетических «крючков» нет полутонов. И это правило незыблемо для зависимостей всех типов.

18. Состояния внутренней 100% готовности к переменам не существует. Мы всегда до конца не готовы к поворотам и изменениям. Всегда есть веские «но» и поводы немного отложить до более благоприятной ситуации. Бесполезно ждать однозначного внутреннего согласия, нужно решаться, опираясь скорее на «пора», чем на эфемерную готовность.

19. Жизнь — это книга, первые главы которой были написаны не тобой. Да, и последующие — тоже, чаще всего.

Мы состоим из убеждений и моделей окружающего нас мира, а мир этот — не абстрактная планета Земля, а вполне конкретный подъезд, офис, дом — место, где мы проводим время. Это друзья, коллеги, родители, продавцы в магазине, с которыми сталкиваешься каждый вечер. Это лента в социальных сетях и так называемые друзья из фейсбука. Мы впитываем взгляды, позиции, точки зрения просто автоматически, мы вдыхаем их с воздухом и становимся такими же или наоборот противоположными, что тоже автоматический момент отрицания. В детстве этот процесс полностью неуправляем. Суть нашей личности собирали другие люди и осознанный родительский вклад (если он вообще был) там далеко не преобладает. То, что мы считаем собой и то, что надо бояться потерять по версии некоторых психологов, — всего лишь в той или иной степени красоты мозаики от нашего окружения. Терять нечего. По-моему, отличная новость. Можно перекроить все в какую угодно сторону.

20. Результат — это количество попыток. А не один меткий выстрел. И уж точно не удача при долгосрочной перспективе.

21. То, что тебе помогало на одном этапе может оказаться тормозом для выхода на следующий. Способность к кардинальным переменам характеризуется возможностью отказываться. Но не только от того, что тебе мешает. Порой очень важно отказаться от того, что тебе помогало в прошлом. Простой пример: правила малого бизнеса не работают в среднем. Расти без отказа от части из них, пусть даже они поднимали процесс вчера, — невозможно. Тоже и с человеческой личностью — ее установками, планами.

22. За зоной комфорта находится зона дискомфорта. А не коробка шоколадных конфет.

23. Жизни без цели не существует. Также, как и состояния без перемен. Вопрос лишь в том: ставишь ли ты эти цели сам или отдаешь на откуп инстинктам (неосознанным целям).

24. Лени — не существует. Есть нелюбимые занятия, нехватка энергии и отсутствие масштабного видения, чтобы захватывало дух от открывающихся перспектив. А лени нет.

25. Себя невозможно найти, себя можно только создать. Искать нечего и некого. Ты всегда есть здесь и сейчас. А твой путь — это то, что у тебя под ногами в данную конкретную секунду, не более того. Тот самый «свой» путь отличается от того, чем он не является только фактом осознанности идущего, который прокладывает пусть и небольшие, но вполне осязаемые цели. Когда эти цели определяют другие люди или они прорастают хаотично через слово «должен» — никакого пути нет, есть набор разношерстных неприкаянных эпизодов.

26. Алкоголь не нужен. Вообще.

27. Нереализованный потенциал причиняет боль. И бесполезно прятаться от этого факта в выбранный уровень комфорта или красивые философские концепции, те же истории про женственность, материнство и прочее. За каждый талант с нас спросится.

28. Банки должны платить тебе, а не ты им. Это единственно возможное финансовое здоровье. Никогда никогда никогда не стоит покупать то, на что не заработал. Никогда. Во всяком случае, если грезишь о серьезных переменах. Мы платим банку не только деньгами, но и своей свободной энергией. Пространства для риска и авантюрных подвижек практически не остается. Прорыв из такого состояния (особенно на новый финансовый уровень) вряд ли возможен.

29. Две способности, которыми нужно овладеть, как можно раньше: умение напрягаться и умение расслабляться.
Любое движение требует напряжения сил в тот или иной момент. Если идти на него нехотя, по нужде — будет расходоваться в два раза больше энергии. Часть на само усилие, остальное — на психическое напряжение. На внутреннюю борьбу. Отсюда необходимость научиться напрягаться по желанию, полюбить свое усилие. При способности напрягаться добровольно, видя в этом исключительно положительный аспект, количество потраченных сил сократится в разы. Будет получаться больше и легче. А умение расслабляться — принимать реальность такой какая она есть, отпускать собственные ожидания, развязывая внутренние узлы и снимая телесное напряжение — второе крыло, без которого на одном напряжении далеко не продвинешься.

30. Два ответа, которым нужно научиться, как можно раньше: «Да» и «Нет». Говорить «Да» ситуациям и людям несмотря на отсутствие гарантий, полной внутренней готовности и различные внешние обстоятельства. И говорить «Нет» в первую очередь самому себе — своим слабостям, страхам и внутренней распущенности. И лишь далеко потом — другим людям.

31. Крутые штуки отличаются от хороших способностью делающего забывать себя. Творец отличается от человека, который что-то неплохо делает тем, что ставит дело выше себя, растворяя в процессе свое эго. И делает это осознанно и любя, а не по отсутствию выбора или чувству долга. Так один маркетолог может быть истинным музыкантом в профессии, а иной музыкант так на всю жизнь и остается тем, кто имеет дело с музыкой.

32. Каждый встреченный на пути знак всегда имеет минимум 3 толкования. 1. Может быть это действительно знак! 2. Может быть ты бредишь и притягиваешь факты за уши. 3. А может быть это испытание — явление противоположное знаку — попытка отвести от выбранного пути, как проверка искренности твоего решения и силы намерения.

Автор статьи Олеся Новикова

Эта статья была автоматически добавлена из сообщества
ОБРАЗ ЖИЗНИ|психология,отношения,общество|цитаты

Источник

32 вывода к 32 годам — Тятя.ру

1. Страшно всем.

И тем, кто финансово независим. И тем, кто талантлив. И тем, кто безоговорочно хорош собой. И тем, кто умён и по-житейски подкован. И тем, кто родился в счастливой полной семье. И тем, кто живёт у океана. И молодым. И старым. И тем, кто признан в своём деле. И тем, у кого понимающий партнёр. И тем, кто занимается йогой. И единоборствами. И медитацией. И тем, кто только начинает. И тем, у кого большой опыт. И тем, у кого с виду абсолютно всё хорошо.

Страшно всем.
Начинать новое. Выходить из привычного круга. Рисковать. Делать что-то, к чему ещё не привык. Страшно за близких. За дело. За свою жизнь, если прижмёт. И много чего ещё.

Страх будет и дальше. Сколько бы ни было опыта, практики, уверенности, признания, денег, таланта, но каждый раз замахиваясь на новую высоту, каждый раз выходя на сцену, каждый раз оборачиваясь на близких — в той или иной степени будет страх. Это нормально. Это значит, что ты ещё жив. И значит, нужно идти вперёд. Через страх. А не пытаться полностью от него избавиться.

2. Жизни без перемен не существует.

Стабильность иллюзорна. Состояние «плато» абсурдно. Мы постоянно находимся в движении. Но это, конечно, толерантная банальность, потому что на деле мы постоянно стареем. И можно сказать ещё жестче, но это уже вотчина Пелевина. Не полезу.

Мы постоянно меняемся внешне и внутренне, эти процессы не прекращаются ни на секунду. И секунды, как меры измерения, здесь даже много. Процессы идут каждое мгновение. Это множество секунд. Вопрос «Меняться или не меняться?» у здравомыслящего человека стоять не может. Только: «Имею ли я отношение к этим изменениям и в какой мере?»

3. Быстро — это медленно, но без перерыва.

Не нужно быстро, интенсивно, круто, очень мощно. Достаточно всего лишь регулярно. Самое главное — держать ритм. По чуть-чуть, но со стабильной последовательностью. А через какое-то время со стороны, это будет выглядеть, как быстро, интенсивно, круто и очень мощно.

4. Создавать больше, чем потреблять.

Иначе, всё. Беспросветная жизнь потребителя, витиевато сплетающаяся в многозначительный вывод: «Всё хорошо, но ничего хорошего».

Человек должен что-то делать. Добровольно и любя. Это формула его душевного здоровья. А бонусом, что любопытно, это единственный способ получать удовольствие от потребления, которое не будет его разрушать. Можно считать этот процесс — здоровым психическим метаболизмом.

5. Сегодня — это то, что ты делал и думал вчера, а завтра — это то, что ты делаешь и думаешь сегодня.

Эту фразу нужно повторять, как мантру до тех пор, пока не дойдёт, что твои родители не имеют отношения к твоим взрослым проблемам. Во всяком случае, они не виноваты, что некому сменить пластинку в твоей голове, которая заела с детства — они туда, в любом случае, не вхожи.

Для тех, кто всё поймёт про родителей и прошлое как таковое, имеет смысл продолжать повторять, пока не накроет, что причины неудач не имеют такого большого значения, как принято считать и вопрос «Почему?» сам по себе не особо-то и ценен, зато тянет энергию по полной программе. Изменить свои действия сегодня можно и вовсе без ответов.

6. Никаких гарантий нет.

Базовое правило мироздания, через которое нужно пропускать все свои решения и планы.

7. Эпоха сокровенных знаний, которые могут что-то изменить, закончена. Настала эра информационной гигиены.

Уже лет пять, как знания не являются главной валютой в вопросе достижений и какого-либо осмысленного существования. Интернет их обесценил своей доступностью. На смену пришла концентрация. Способность удерживать внимание на задаче и не расплёскивать интерес — вот кто правит. А этот навык находится в прямой зависимости от информационного шума, который сегодня повсюду. Чем больше словесного мусора вокруг — тем слабее фокус. Чем больше чужих мыслей, тем тише собственный голос. Постоянное нахождение в интернет-потоке атрофирует способность к самоосознанию, подменяя суть концепциями о том, что ею является.

8. Радость и удовольствие — не одно и то же.

Не страшно отказать себе в удовольствиях, страшно не познать радость.

9. Страдания существуют.

Будда был всё-таки прав. Страдания существуют. Страдают все. И те, у кого ничего нет, и те, у кого есть всё. А кто конкретно в эту минуту не страдает, уйдёт в боль в следующую, как только изменится курс доллара, произойдёт теракт, получит в ответ, что его не любят, увидит грязный подъезд, не дождётся ответа на сообщение, не получит денег или по любому другому дуновению ветерка. Страдания существуют. И всегда без повода, если вспомнить финал любого человеческого существа.

10. Быть счастливыми могут не все.

Это удивительно простая вещь, которую я так долго отказывалась видеть. Слишком сильна в нас вера в чудо на счастливый финал по случаю собственной непревзойдённой уникальности. Но каждый ли человек может пробежать 42-километровый беговой марафон? В теории — да, человеческие ресурсы способны на это, но на практике это доступно только натренированному человеку.

Конечно, нетренированный может натренироваться. Но цепочка удлиняется и её важно увидеть. Прямо сейчас неподготовленный человек на это не способен.

Каждый ли человек может быть счастливым? Да, разумеется! Но это в теории. На практике стабильно счастливыми, то есть спокойными, уравновешенными, благостными, если хотите, могут быть только те, кому доступна дисциплина ума. Чей ум способен (натренирован) не дёргаться по всем многочисленным поводам, которые его окружают. Кто может оставаться в равновесии радости не только в штиль, но и в порыве неприятных ситуаций. В противном случае все бесконечные поводы от царапины на твоём авто будут выкидывать тебя в боль, раздражение и тревогу. И это всего лишь какая-то машина, а есть же ситуации и посерьёзнее. Это самсара, детка. Счастливым такой загнанный ум, реагирующий на любое происшествие, можно назвать лишь в статусе Инстаграма.

11. Радость — это равновесие ума.

Скажите мне это лет так 5 назад, я бы покрутила у виска. Когда тебе днём и ночью мечтается большая светлая любовь, дружная семья, интересное доходное дело, возможность работать на себя, а не на другого, насыщенная путешествиями жизнь, кажется, что всё-таки ты имеешь какие-то представления о радости, как минимум, о собственной. Да, ты сейчас во многом не удовлетворён, да, что-то может вывести тебя из себя, да, ты страдаешь. Так это и понятно. Но ты знаешь, к чему стремиться. Ты знаешь, где твоя осязаемая непреходящая радость, заглядываясь на свои, столь манящие, мечты.

Радость — это состояние полного равновесного покоя ума, которое достигается при освобождении от слепых (автоматических) реакций этого самого ума. Здоровый, возможно единственный, способ познать (и развивать) такое состояние во взрослом возрасте — это глубокая медитация наблюдения.

12. Фрукты — не кислотная, а щелочная еда.

Если по-научному, свежие спелые фрукты и почти все овощи вызывают в организме щелочную реакцию и помогают нейтрализовать избыток кислоты в нём, а крахмал, сахар, мясопродукты, жиры, масла, молочная продукция, наоборот, организм закисляют. Полное описание есть в таблице Н. Уокера и Р. Поупа, которая доступна через поисковую систему.

13. «Мое тело само знает, что ему лучше» — одна из самых коварных ловушек ума.

Тело алкоголика хочет выпить, тело курильщика мечтает о сигаретке, наше тело жаждет шоколада и картошки-фри. О каком «лучше знает» все говорят? Также, как и ум живёт автоматическими реакциями, не давая человеку делать элементарные подвижки в своей жизни, так и тело подчиняется привычкам и хаотичным импульсам вожделения.

14. Питание влияет не только на наше тело, но и на наше сознание.

Подобно алкоголю, который заметно изменяет наше сознание, притупляя его, некоторые продукты несут схожий эффект, но в менее выраженной и зачастую неосознаваемой форме. Еда может замедлять и расфокусировать голову, ослабляя контроль, силу осознанности и ясность восприятия. Слегка «затуманенное» состояние становится уровнем нормы, позволяя человеку забыть, что значит лёгкость и ясность на самом деле. Наиболее «свободная» еда — это свежие овощи и фрукты, а также растительная пища и злаки, приготовленные простым способом с минимальным содержанием масла, приправ и соли.

15. Денег нужно столько, чтобы о них не думать.

16. Мы все одинаковые намного больше, чем разные.

Значение личной уникальности сильно преувеличенно и не даёт нам быстро решать свои проблемы. Все ответы и решения давно существуют, а зацикленность на собственной неповторимости не даёт человеку задвинуть свое эго туда, где ему было бы полезно всегда находиться и без помех воспринимать окружающую его реальность со всеми ответами и подсказками.

17. Зависимость лечится только 100% отказом.

Нельзя выпить один фужер вина, если ты алкоголик. Нельзя иногда курить, если пытаешься бросить. Тебя будет скручивать постоянно. Взлёты и падения. Срывы. В вопросах психоэнергетических «крючков» нет полутонов. И это правило незыблемо для зависимостей всех типов.

18. Состояния внутренней 100%-ной готовности к переменам не существует.

19. Жизнь — это книга, первые главы которой, были написаны не тобой.

Да, и последующие — тоже, чаще всего.

Мы состоим из убеждений и моделей окружающего нас мира, а мир этот — не абстрактная планета Земля, а вполне конкретный подъезд, офис, дом — место, где мы проводим время. Это друзья, коллеги, родители, продавцы в магазине, с которыми сталкиваешься каждый вечер. Это лента в социальных сетях и так называемые друзья из Фейсбука. Мы впитываем взгляды, позиции, точки зрения просто автоматически, мы вдыхаем их с воздухом и становимся такими же или наоборот противоположными, что тоже автоматический момент отрицания. В детстве этот процесс полностью неуправляем. Суть нашей личности собирали другие люди и осознанный родительский вклад (если он вообще был) там далеко не преобладает. То, что мы считаем собой и то, что надо бояться потерять по версии некоторых психологов, — всего лишь в той или иной степени красоты мозаики от нашего окружения. Терять нечего. По-моему, отличная новость. Можно перекроить всё в какую угодно сторону.

20. Результат — это количество попыток.

А не один меткий выстрел. И уж точно не удача при долгосрочной перспективе.

21. То, что тебе помогало на одном этапе, может оказаться тормозом для выхода на следующий.

Способность к кардинальным переменам характеризуется возможностью отказываться. Но не только от того, что тебе мешает. Порой очень важно отказаться от того, что тебе помогало в прошлом. Простой пример: правила малого бизнеса не работают в среднем. Расти без отказа от части из них, пусть даже они поднимали процесс вчера, — невозможно. То же и с человеческой личностью, её установками, планами.

22. За зоной комфорта находится зона дискомфорта. А не коробка шоколадных конфет.

23. Жизни без цели не существует.

Так же, как и состояния без перемен. Вопрос лишь в том: ставишь ли ты эти цели сам или отдаёшь на откуп инстинктам (неосознанным целям).

24. Лени — не существует.

25. Себя невозможно найти, себя можно только создать.

Искать нечего и некого. Ты всегда есть здесь и сейчас. А твой путь — это то, что у тебя под ногами в данную конкретную секунду, не более того. Тот самый «свой» путь отличается от того, чем он не является только фактом осознанности идущего, который прокладывает пусть и небольшие, но вполне осязаемые цели. Когда эти цели определяют другие люди или они прорастают хаотично через слово «должен» — никакого пути нет, есть набор разношёрстных неприкаянных эпизодов.

26. Алкоголь не нужен. Вообще.

27. Нереализованный потенциал причиняет боль.

За каждый талант с нас спросится.

28. Банки должны платить тебе, а не ты им. Это единственно возможное финансовое здоровье.

Никогда, никогда, никогда не стоит покупать то, на что не заработал. Никогда. Во всяком случае, если грезишь о серьёзных переменах. Мы платим банку не только деньгами, но и своей свободной энергией. Пространства для риска и авантюрных подвижек практически не остаётся. Прорыв из такого состояния (особенно на новый финансовый уровень) вряд ли возможен.

29. Две способности, которыми нужно овладеть, как можно раньше: умение напрягаться и умение расслабляться.

А умение расслабляться — приниматься реальностью такой, какая она есть, отпускать собственные ожидания, развязывая внутренние узлы и снимая телесное напряжение через техники йоги и дыхания, например, — второе крыло, без которого на одном напряжении далеко не продвинешься.

30. Два ответа, которым нужно научиться, как можно раньше: «Да» и «Нет».

Говорить «Да» ситуациям и людям, несмотря на отсутствие гарантий, полной внутренней готовности и различные внешние обстоятельства. И говорить «Нет» в первую очередь самому себе — своим слабостям, страхам и внутренней распущенности. И лишь далеко потом — другим людям.

31. Крутые штуки отличаются от хороших способностью делающего забывать себя.

Творец отличается от человека, который что-то неплохо делает тем, что ставит дело выше себя, растворяя в процессе свое эго. И делает это осознанно и любя, а не по отсутствию выбора или чувству долга. Так один маркетолог может быть истинным музыкантом в профессии, а иной музыкант так на всю жизнь и остаётся тем, кто имеет дело с музыкой.

32. Каждый встреченный на пути знак всегда имеет минимум 3 толкования.

1. Может быть это действительно знак!
2. Может быть ты бредишь и притягиваешь факты за уши.
3. А может быть это испытание — явление противоположное знаку — попытка отвести от выбранного пути, как проверка искренности твоего решения и силы намерения.

Переменам быть и перемены есть.

Автор: Олеся Новикова

Значение сочетания сывороточного карциноэмбрионального антигена и ПЭТ / КТ в прогнозировании мутации EGFR при немелкоклеточном раке легкого — Gu

Введение

Рак легких является ведущей причиной смерти от рака в мире. Около 85% случаев рака легких — это немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ). Рецептор эпидермального фактора роста ( EGFR ) представляет собой трансмембранный гликопротеин, который способствует пролиферации, дифференцировке, ангиогенезу и антиапоптозу опухолевых клеток.Некоторые исследования показали, что мутации EGFR чаще встречаются у женщин, некурящих, жителей Восточной Азии и пациентов с аденокарциномой (1,2). EGFR Ингибиторы тирозинкиназы ( EGFR -TKI) оказались более эффективными, чем традиционная химиотерапия, у пациентов с EGFR с НМРЛ с положительной мутацией (3,4). Между тем, EGFR -TKI малоэффективны у пациентов с EGFR дикого типа (5). Таким образом, выяснение статуса мутации EGFR у пациентов очень важно перед противоопухолевой терапией.Однако иногда бывает трудно получить достаточно опухолевых тканей для тестирования мутации EGFR , особенно у пациентов на поздних стадиях. Следовательно, необходима разработка других неинвазивных методов для прогнозирования статуса мутации EGFR . ¹⁸ F-Фтор-2-дезоксиглюкоза (¹⁸ F-FDG) позитронно-эмиссионная томография / компьютерная томография (ПЭТ / КТ) широко используется для определения стадии и оценки лечебного эффекта НМРЛ. Поглощение ФДГ, обычно с использованием SUVmax первичной опухоли, может отражать пролиферацию опухолевых клеток и метаболизм глюкозы (6).В некоторых исследованиях сообщается, что SUVmax можно использовать для прогнозирования статуса мутации EGFR при НМРЛ (7-11). Однако единого мнения нет. Таким образом, необходимы дополнительные исследования для изучения связи между SUVmax и статусом мутации EGFR при НМРЛ. Онкомаркеры широко используются для диагностики, мониторинга ответа на терапию и рецидивов НМРЛ (12,13). Карциноэмбриональный антиген (CEA) — один из наиболее часто используемых онкомаркеров при НМРЛ. Некоторые исследования показали, что CEA является значимым прогностическим предиктором у пациентов, получавших EGFR -TKI (14-16).Некоторые исследователи также предположили, что уровень CEA имеет некоторую связь со статусом мутации EGFR (17). Однако консенсусных выводов достигнуто не было.

В нескольких исследованиях изучалась ценность сочетания клинических признаков, уровня СЕА в сыворотке до лечения и SUVmax первичной опухоли для прогнозирования статуса мутации EGFR при НМРЛ. Таким образом, цель данного исследования — проанализировать эти клинические параметры при НМРЛ и оценить, могут ли они помочь в прогнозировании статуса мутации EGFR при НМРЛ.

Методы

Пациенты и критерии включения

Это исследование было одобрено нашим институциональным наблюдательным советом (одобрение первой редакции 2013-07 гг.). Мы ретроспективно изучили медицинские карты всех пациентов, у которых был диагностирован НМРЛ, которые прошли тест на мутацию EGFR и сканирование ПЭТ / КТ ¹⁸ F-FDG менее чем за один месяц до получения какой-либо терапии в период с марта 2011 г. по декабрь 2014 г. в нашей больнице (г. Первая дочерняя больница Университета Сунь Ятсена).Характеристики пациентов были собраны с помощью диаграммы, включая возраст, пол, статус курения и уровень CEA в сыворотке крови до начала лечения. Статус курения определялся следующим образом: никогда не курившие, выкурили менее 100 сигарет за свою жизнь; нынешними курильщиками были те, кто все еще курил или бросил курить менее 1 года на момент постановки диагноза; остальные пациенты были отнесены к категории бывших курильщиков. Были собраны патологические характеристики, включая гистологию опухоли, степень и стадию. Пациенты были распределены по стадиям в соответствии с изданием 7 Руководства Американского объединенного комитета по раку (AJCC) (18).Мы исключили пять пациентов с неизмеримыми поражениями.

ПЭТ / КТ сканирование

ПЭТ / КТ сканирований выполняли на сканере Gemini GXL 16 (Philips, Нидерланды) в трехмерном режиме сбора данных. Все пациенты должны были голодать не менее 6 часов, чтобы убедиться, что уровень глюкозы в крови не превышает 140 мг / дл перед инъекцией ¹⁸ F-FDG. После i.v. инъекция 5,18 МБк / кг ¹⁸ F-FDG через час визуализация была получена с использованием низкой дозы (120 кВп, 140 мА, 0.5 с на один оборот КТ, коллимация 5 мм, толщина среза 7,5 мм, шаг 1,25 мм) двухсрезовое КТ сканирование от головы до проксимального отдела бедер. Впоследствии были получены изображения ПЭТ со временем 3 мин для каждого положения кровати в 3-мерном режиме. После этого изображения ПЭТ были объединены с изображениями КТ с коррекцией ослабления для восстановления изображения ПЭТ / КТ с использованием максимизации ожидания упорядоченного подмножества (OSEM) (4 итерации и 8 подмножеств). Окончательные изображения были представлены компанией Xeleris Software (Philips, Нидерланды).

Анализ данных ПЭТ

Данные FDG-PET были проанализированы двумя опытными врачами ядерной медицины, которые не знали о статусе мутации EGFR .Области интереса (ROI) были размещены на первичных опухолях и средостенных лимфатических узлах с аномальным поглощением ФДГ на реконструированных изображениях ПЭТ / КТ. Чтобы минимизировать вариации в зависимости от размера ROI, максимальная активность пикселей в пределах ROI была записана для расчета SUVmax [SUVmax = максимальная активность пикселей / (введенная доза / масса тела)].

EGFR мутационный анализ

Геномную ДНК экстрагировали из опухолевой ткани с использованием набора тканей QIAamp DNA, фиксированного в формалине и залитого парафином (Qiagen.Hilden, Германия) в соответствии с протоколами производителя. ДНК разводили до 2–3 нг / мкл в тесте на мутацию EGFR . Набор для обнаружения мутации EGFR (Amoy Diagnostics, Сямэнь, Китай), основанный на технологии Amplified Refractory Mutation System (ARMS), был использован для идентификации 29 наиболее распространенных типов мутаций EGFR в экзонах 18–21. Все эксперименты проводились в соответствии с протоколами производителя. Вкратце, десять нанограммов геномной ДНК добавляли к 45 мкл основной смеси для ПЦР, содержащей праймеры для ПЦР, флуоресцентные зонды, ДНК-полимеразу Taq и буфер для ПЦР для каждого анализа.Цикл ПЦР включает 3 этапа: во-первых, 1 цикл при 95 ° C в течение 5 мин; во-вторых, 15 циклов 95 ° C в течение 25 с, 64 ° C в течение 20 с, 72 ° C в течение 20 с; в-третьих, 31 цикл: 93 ° C в течение 25 секунд, 60 ° C в течение 35 секунд, 72 ° C в течение 20 секунд. После 47 циклов амплификации флуоресцентный сигнал собирали из каналов FAM и HEX. Результаты были проанализированы в соответствии с протоколами производителя.

Статистический анализ

Тест Стьюдента t был использован для анализа непрерывных переменных.Результаты выражали как среднее значение ± стандартное отклонение (SD). Для анализа категориальных переменных использовался точный критерий Фишера или критерий хи-квадрат Пирсона. Кривая рабочей характеристики приемника (ROC) была построена для получения значений отсечки SUVmax и CEA. Прогностическая ценность установленных критериев оценивалась путем расчета площади под кривой ROC (AUC). Для проверки связи между клиническими факторами и мутациями EGFR был проведен многомерный логистический регрессионный анализ.Уравнение многомерной логистической регрессии использовалось для прогнозирования статуса мутации EGFR определенного пациента. Двустороннее значение P менее 0,05 считалось статистически значимым. Все статистические анализы были выполнены с использованием программного обеспечения SPSS (версия 20.0; SPSS, Чикаго, Иллинойс).

Результаты

Характеристики пациентов и их связь с

мутациями EGFR

Исходные характеристики пациентов приведены в Таблице 1 .Всего в исследование были включены 210 пациентов (132 мужчины и 78 женщин). Мужчины (n = 132; 62,9%), некурящие (n = 120; 57,1%) и на поздних стадиях (III-IV) (n = 152; 72,4%) составили большинство населения. Медиана SUVmax первичных опухолей составила 8,5 (4,8–12,9). Среди них 70 пациентов (33,3%) оказались положительными по мутации EGFR , остальные — EGFR дикого типа. Преобладающими подтипами мутаций были точечная мутация L858R в экзоне 21 (n = 35; 16,7%) и делеция экзона 19 (n = 31; 14.8%). Остальные включали точечную мутацию L861Q в экзоне 21 (n = 2; 1,0%), миссенс-мутацию S768I в экзоне 20 (n = 1; 0,5%) и точечную мутацию G719X в экзоне 18 (n = 1; 0,5%). Для оценки связи между клиническими факторами и статусом мутации EGFR использовали одномерный анализ. Результаты были обобщены в Таблице 2 . Мутации EGFR чаще встречались у женщин, чем у мужчин (57,7% против 18,9%; P <0,001), у никогда не куривших, чем у курильщиков (47,5% против 14.4%; P <0,001), у пациентов с аденокарциномами, чем у пациентов без аденокарцином (41,0% против 8,2%; P <0,001). Ни степень опухоли (P = 0,081), ни размер опухоли (P = 0,316) не показали релевантности со статусом мутации EGFR .

Таблица 1 Характеристика 210 пациентов
Таблица полная

Таблица 2 Связь между клиническими особенностями и EGFR
Полная таблица

Связь между мутациями SUVmax и EGFR

Кривая ROC показала, что точка отсечки SUVmax равнялась 9.0, а рассчитанная AUC составила 0,62 (95% ДИ, 0,54–0,70). В соответствии с выбранной точкой отсечения SUVmax 9,0, у которой чувствительность, специфичность, положительные и отрицательные прогностические значения для прогнозирования мутации EGFR составляли 70,0%, 54,3%, 43,3% и 78,4%, пациенты были разделены на две группы: группа с низким SUVmax ( <9,0) и группа с высоким SUVmax (≥9,0). Мутации EGFR чаще встречались в группе с низким SUVmax, чем в группе с высоким SUVmax (43,6% против 22,0%; P = 0.001).

Связь между CEA и

мутациями EGFR

Кривая ROC показала, что точка отсечения CEA составляла 7,0 нг / мл, а расчетная AUC составляла 0,56 (95% ДИ, 0,47–0,64). В соответствии с выбранной точкой отсечения CEA 7,0 нг / мл, чувствительность, специфичность, положительные и отрицательные прогностические значения для прогнозирования мутации EGFR составляли 54,3%, 60,0%, 40,4% и 72,5%, пациенты были разделены на две группы: Группа CEA (<7.0 нг / мл) и группе с высоким РЭА (≥7,0 нг / мл). EGFR мутации чаще обнаруживались в группе с высоким CEA, чем в группе с низким CEA (40,4% против 27,6%; P = 0,05).

Многомерный анализ

Мы включили все переменные с P <0,2 в одномерный анализ, включая SUVmax, пол, гистологию опухоли, CEA, статус курения, возраст и степень опухоли, в многомерный логистический регрессионный анализ, несмотря на статус курения (P = 0.121), возраст (P = 0,864) и степень опухоли (P = 0,364), остальные были статистически значимыми предикторами мутации EGFR (, таблица 3, ).

Таблица 3 Многомерный анализ различных факторов прогнозирования мутации EGFR
Полная таблица
Анализ кривой

ROC показал, что комбинация этих четырех факторов имела относительно высокую прогностическую ценность, поскольку рассчитанная AUC составляла 0,80 (95% ДИ, 0.74–0,86) ( Рисунок 1 ). Используя точку отсечения 0,3432, которая была выбрана по максимальному индексу Юдена, чувствительность и специфичность для прогнозирования мутаций EGFR составили 81,4% и 72,1% соответственно.

Рисунок 1 ROC-кривая объединения четырех факторов (SUVmax, пол, гистология, CEA) для прогнозирования мутации EGFR . Для прогнозирования мутации EGFR AUC составляла 0,80 (95% ДИ 0,74–0,86).

Формулировка многомерной логистической регрессии была выполнена следующим образом: Y = e ^x / (1+ e ^x), X = -8.273 + 1,713 × пол +1,402 × гистология +0,735 × CEA +0,921 × SUVmax. Сравните расчетные значения пациентов с точкой отсечения 0,3432 (, таблица 4, ). Если значение было выше 0,3432, мы пришли к выводу, что пациент EGFR положителен по мутации, в противном случае — EGFR дикого типа.

Таблица 4 Баллы для прогнозирования мутации EGFR
Полная таблица

Обсуждение

Определение молекулярного профиля стало стандартной практикой при ведении пациентов с НМРЛ.Однако эта оценка часто затрудняется недостаточностью опухолевой ткани или техническими недостатками (19). Следовательно, альтернативные неинвазивные стратегии, такие как ¹⁸ F-FDG PET / CT, сывороточный CEA, для прогнозирования профиля мутаций могут помочь преодолеть эти ограничения и могут быть полезными.

Наши результаты показывают, что захват ¹⁸ F-FDG значительно увеличивается в опухолях NSCLC, несущих мутации EGFR . Мы обнаружили, что SUVmax ниже 9.0 был значимым предиктором мутаций EGFR . Предыдущие исследования показали противоречивые результаты. Хуанг и др. показал, что пациенты с SUVmax выше 9,5 с большей вероятностью будут иметь положительную мутацию EGFR (11). Исследование Ko et al. соответствует Huang et al. , они пришли к выводу, что SUVmax выше 6.0 был значимым предиктором мутаций EGFR (9). Возможная причина различных наблюдаемых результатов заключается в том, что для получения дополнительной информации о пациентах с НМРЛ гистологический тип наших исследуемых случаев был не только аденокарциномой, но также включал неаденокарциному (23.3%), который, как было показано, имеет другое поглощение ФДГ и отличную биологию опухоли. И наоборот, Mak et al. сообщил, что высокое значение поглощения ФДГ (нормализованный SUVmax> 5) коррелировало с генотипом EGFR дикого типа у пациентов с западным НМРЛ (10). Поскольку их исследование включало в основном белых людей 88% (88/100), их результат может представлять только людей с Запада. Na et al. исследовал 100 южнокорейских пациентов с НМРЛ и пришел к выводу, что пациенты с низким SUVmax (<9,2) с большей вероятностью будут иметь положительную мутацию EGFR (7).Однако их исследование имеет относительно небольшой размер выборки (n = 100), а частота мутаций EGFR составила всего 21%, что ниже, чем у обычных азиатских популяций. В наше исследование было включено 210 пациентов с НМРЛ со стадией I-IV и гистологией опухоли, которая включает аденокарциному, плоскоклеточную карциному, аденосквамозно-клеточную карциному и другие подтипы НМРЛ, как курильщиков, так и некурящих, таким образом, может быть лучшим представителем пациентов с НМРЛ в азиатской популяции.

Наше исследование показало, что пациенты с более низким SUVmax с большей вероятностью будут иметь мутацию EGFR по следующим причинам: (I) При НМРЛ SUVmax различается по типам гистологии: плоскоклеточная карцинома всегда имела более высокий SUVmax, чем аденокарцинома (20 -23).Серия исследований подтвердила, что величина поглощения ФДГ во многом связана с транспортом глюкозы (GLUT). При НМРЛ GLUT1 является доминирующим в определении значения поглощения ФДГ. Экспрессия GLUT1 при плоскоклеточной карциноме намного выше, чем при аденокарциноме (20,21), что может привести к увеличению поглощения ФДГ. Поскольку мутации EGFR чаще встречаются при аденокарциноме, чем при плоскоклеточной карциноме, основная причина того, что пациенты с более низким SUVmax с большей вероятностью будут иметь положительную мутацию EGFR , может быть вызвана гистологическими различиями.(II) Этот результат может быть связан с белком фактора, индуцируемого гипоксией (HIF-1). Было показано, что HIF-1 связан с регуляцией генов, ответственных за повышенное использование глюкозы и энергетический метаболизм (24). А линии клеток с мутациями EGFR экспрессировали высокие базальные уровни HIF-1α (25). ¹⁸ Поглощение F-FDG также связано с присутствием HIF-1 при других злокачественных новообразованиях, включая шейку матки, рак головного мозга, ротовой полости и груди (24,26,27). Однако в некоторых исследованиях сообщалось об отсутствии корреляции или отрицательной корреляции между SUVmax и HIF-1 (24,28).(III) SUVmax также различается по подтипам аденокарциномы легких: Chiu et al. сообщил, что значения экспрессии GLUT1 и поглощения FDG были ниже при аденокарциноме терминального респираторного типа (TRU), чем при типе не TRU (29). Аденокарцинома TRU-типа с большей вероятностью будет иметь положительную мутацию EGFR (30). Кроме того, SUVmax лепидных карцином, который чаще является положительным по мутации EGFR , обычно ниже, чем у других типов аденокарциномы (31,32).

В настоящее время сывороточный CEA широко используется для диагностики и оценки лечения НМРЛ, особенно аденокарциномы.В некоторых исследованиях сообщалось, что уровень CEA в сыворотке до лечения может прогнозировать терапевтический эффект EGFR -TKI при НМРЛ. Высокий уровень CEA перед лечением указывает на хороший ответ на EGFR -TKI и лучший прогноз, чем нормальный уровень CEA (14-16). Shoji et al. впервые сообщил о взаимосвязи между уровнем СЕА в сыворотке и мутацией EGFR при НМРЛ (17). Их исследование показало, что пациенты с более высоким уровнем CEA в сыворотке во время рецидива с большей вероятностью будут иметь мутацию EGFR , чем пациенты с более низким уровнем CEA в сыворотке.

Механизм предсказания CEA статуса мутации EGFR неясен. Ли и др. обнаружил, что в NSCLC мутация EGFR имела положительную корреляцию с уровнем CEA в опухолевой ткани (r = 0,237, P = 0,003) (33). Поскольку как СЕА, так и активация сигнального пути EGFR ингибируют апоптоз, одна из возможных гипотез может заключаться в том, что повышенный уровень СЕА вызван активацией сигнального пути против апоптоза, вызванным мутацией EGFR (34,35).Наше исследование соответствует Shoji et al. , указывая на то, что мутация EGFR с большей вероятностью произойдет у пациентов с НМРЛ с уровнем CEA до лечения выше 7,0 нг / мл, прогнозируемое значение чувствительности и специфичности составило 54,3% и 60,0% соответственно.

Хотя в предыдущих исследованиях сообщалось, что вариабельное поглощение ФДГ, уровни СЕА в сыворотке коррелируют со статусом мутации, соответственно, только один параметр не является достаточно сильным и достоверным для прогнозирования статуса мутации.Основным преимуществом нашего исследования было то, что мы установили надежные клинические критерии и критерии визуализации для прогнозирования мутации EGFR : высокие уровни SUVmax и сывороточного CEA. Наше исследование объединило уровень CEA до лечения, SUVmax, пол и гистологию опухоли для прогнозирования статуса мутации EGFR , что более эффективно, чем один фактор, такой как уровень CEA или SUVmax. Вычисленное объединение AUC составило 0,80, чувствительность и специфичность для прогнозирования мутации EGFR составила 81,4% и 72.1%, в то время как рассчитанные AUC SUVmax и сывороточного CEA составляли 0,62 и 0,56 соответственно.

В нашем исследовании есть некоторые ограничения: во-первых, хотя размер выборки в нашем исследовании больше, чем в других аналогичных опубликованных исследованиях, он все еще относительно невелик. Во-вторых, это ретроспективное исследование и требует проспективного исследования, чтобы подтвердить наш вывод. Более того, детальный механизм между мутацией SUVmax и EGFR все еще не ясен. Требуются более фундаментальные экспериментальные исследования.

Выводы

В заключение, сочетание использования уровня СЕА до лечения, SUVmax, пола и гистологии опухоли практично для прогнозирования статуса мутации EGFR у пациентов с НМРЛ, особенно когда опухолевой ткани недостаточно или они не могут выполнить мутацию EGFR . контрольная работа. Однако для подтверждения текущего вывода необходимы крупные многоцентровые проспективные клинические испытания.

Благодарности

Финансирование : Эта работа поддержана грантами Национального фонда естественных наук Китая (81570008, Y Zhou), Фонда естественных наук провинции Гуандун в Китае (2014A030313052, Y Zhou) и Программы науки и технологий Гуанчжоу, Китай (2014J4100132, И Чжоу).

Конфликт интересов : Авторы не заявляют о конфликте интересов.

Этическое заявление : Все процедуры, выполняемые в исследованиях с участием людей, соответствовали этическим стандартам институционального и национального исследовательского комитета, а также Хельсинкской декларации 1964 года и более поздним поправкам к ней или сопоставимым этическим стандартам. Для этого типа исследования формального согласия не требуется.Это исследование было одобрено нашим институциональным наблюдательным советом (одобрение первой редакции 2013-07 гг., Первая дочерняя больница Университета Сунь Ятсена).

Список литературы

Shigematsu H, Lin L, Takahashi T и др. Клинические и биологические особенности, связанные с мутациями гена рецептора эпидермального фактора роста при раке легких. J Natl Cancer Inst 2005; 97: 339-46. [Crossref] [PubMed]
Sequist LV, Bell DW, Lynch TJ и др.Молекулярные предикторы ответа на антагонисты рецепторов эпидермального фактора роста при немелкоклеточном раке легкого. Дж. Клин Онкол 2007; 25: 587-95. [Crossref] [PubMed]
Wu YL, Zhou C, Hu CP, et al. Афатиниб в сравнении с цисплатином и гемцитабином для лечения первой линии азиатских пациентов с далеко зашедшим немелкоклеточным раком легкого, несущим мутации EGFR (LUX-Lung 6): открытое рандомизированное исследование фазы 3. Ланцет Онкол 2014; 15: 213-22. [Crossref] [PubMed]
Sequist LV, Yang JC, Yamamoto N, et al.Фаза III исследования афатиниба или цисплатина в сочетании с пеметрекседом у пациентов с метастатической аденокарциномой легких с мутациями EGFR. Дж. Клин Онкол 2013; 31: 3327-34. [Crossref] [PubMed]
Mok TS, Wu YL, Thongprasert S, et al. Гефитиниб или карбоплатин-паклитаксел при аденокарциноме легких. N Engl J Med 2009; 361: 947-57. [Crossref] [PubMed]
Хигаши К., Уэда Ю., Арисака Ю. и др. Поглощение 18F-FDG как биологический прогностический фактор рецидива у пациентов с хирургически удаленным немелкоклеточным раком легкого.Журнал Nucl Med 2002; 43: 39-45. [PubMed]
Na II, Бьюн Б.Х., Ким К.М. и др. Поглощение 18F-FDG и мутации EGFR у пациентов с немелкоклеточным раком легкого: ретроспективный анализ одного учреждения. Рак легких 2010; 67: 76-80. [Crossref] [PubMed]
Кайседо С., Гарсия-Веллосо М.Дж., Лосано М.Д. и др. Роль [(1) (8) F] FDG PET в прогнозировании статуса мутаций KRAS и EGFR у пациентов с распространенным немелкоклеточным раком легкого. Eur J Nucl Med Mol Imaging 2014; 41: 2058-65.[Crossref] [PubMed]
Ko KH, Hsu HH, Huang TW и др. Значение поглощения F-18-FDG на уровне ПЭТ / КТ и СЕА для прогнозирования мутаций рецептора эпидермального фактора роста при аденокарциноме легких. Eur J Nucl Med Mol Imaging 2014; 41: 1889-97. [Crossref] [PubMed]
Мак Р.Х., Дигумарти С.Р., Музиканский А. и др. Роль позитронно-эмиссионной томографии 18F-фтордезоксиглюкозы в прогнозировании мутаций рецептора эпидермального фактора роста при немелкоклеточном раке легкого. Онколог 2011; 16: 319-26.[Crossref] [PubMed]
Huang CT, Yen RF, Cheng MF, et al. Корреляция максимального стандартизированного значения поглощения фтордезоксиглюкозо-позитронно-эмиссионной томографии F-18 и мутаций EGFR при распространенной аденокарциноме легких. Мед Онкол 2010; 27: 9-15. [Crossref] [PubMed]
Cedres S, Nunez I., Longo M, et al. Сывороточные опухолевые маркеры CEA, CYFRA21-1 и CA-125 связаны с худшим прогнозом при распространенном немелкоклеточном раке легкого (НМРЛ). Clin рака легких 2011; 12: 172-9.[Crossref] [PubMed]
Sakao Y, Tomimitsu S, Takeda Y и др. Карциноэмбриональный антиген как фактор прогнозирования послеоперационного рецидива опухоли при ранней стадии аденокарциномы легкого. Eur J Cardiothorac Surg 2004; 25: 520-2. [Crossref] [PubMed]
Окамото Т., Накамура Т., Икеда Дж. И др. Сывороточный карциноэмбриональный антиген как прогностический маркер чувствительности к гефитинибу при распространенном немелкоклеточном раке легкого. Eur J Cancer 2005; 41: 1286-90. [Crossref] [PubMed]
Qin HF, Qu LL, Liu H, et al.Изменение уровня CEA в сыворотке и его значение до и после терапии гефитинибом у пациентов с далеко зашедшим немелкоклеточным раком легкого. Азиатский Pac J Cancer Prev 2013; 14: 4205-8. [Crossref] [PubMed]
Chiu CH, Shih YN, Tsai CM, et al. Сывороточные опухолевые маркеры как предикторы выживаемости у пациентов с запущенным немелкоклеточным раком легкого, получавших гефитиниб. Рак легких 2007; 57: 213-21. [Crossref] [PubMed]
Сёдзи Ф, Йошино И., Яно Т. и др. Уровень карциноэмбрионального антигена в сыворотке крови связан с мутациями рецептора эпидермального фактора роста при рецидивирующих аденокарциномах легких.Рак 2007; 110: 2793-8. [Crossref] [PubMed]
Edge SB, Комптон CC. Американский объединенный комитет по раку: 7-е издание руководства AJCC по стадированию рака и будущее TNM. Энн Сург Онкол 2010; 17: 1471-4.
Lozano MD, Zulueta JJ, Echeveste JI, et al. Оценка рецептора эпидермального фактора роста и статуса мутации K-ras в цитологических окрашенных мазках пациентов с немелкоклеточным раком легкого: корреляция с клиническими исходами. Онколог 2011; 16: 877-85.[Crossref] [PubMed]
Suzawa N, Ito M, Qiao S, et al. Оценка факторов, влияющих на поглощение ФДГ при немелкоклеточном раке легкого на ПЭТ / КТ, путем исследования гистологических различий в экспрессии переносчиков глюкозы 1 и 3 и размера опухоли. Рак легких 2011; 72: 191-8. [Crossref] [PubMed]
Brown RS, Leung JY, Kison PV и др. Транспортеры глюкозы и поглощение ФДГ при нелеченом первичном немелкоклеточном раке легкого человека. J. Nucl Med 1999; 40: 556-65.[PubMed]
Ван И, Ма С., Донг М. и др. Оценка факторов, влияющих на максимальное стандартизированное значение поглощения метастатических лимфатических узлов при различных гистологических типах немелкоклеточного рака легкого на ПЭТ-КТ. BMC Pulm Med 2015; 15:20. [Crossref] [PubMed]
Zhang J, Chen L, Chen Y, et al. Васкулярность опухоли и метаболизм глюкозы коррелировали при аденокарциноме, но не при плоскоклеточном раке легкого. PLoS One 2014; 9: e
. [Crossref] [PubMed]
Cerci SS, Yalcin Y, Bozkurt KK, et al.Индуцируемый гипоксией фактор-1альфа, адреномедуллин и Bcl-2, хотя и ожидается, не связаны с повышенным поглощением фтор-18-фтордезоксиглюкозы при раке эндометрия. Ад Дж. Nucl Med 2015; 18: 228-32. [PubMed]
Lee JG, Wu R. Комбинация эрлотиниба и цисплатина ингибирует рост и ангиогенез посредством c-MYC и HIF-1альфа при EGFR-мутированном раке легкого in vitro и in vivo. Неоплазия 2015; 17: 190-200. [Crossref] [PubMed]
Park SI, Suh DS, Kim SJ, et al.Корреляция между экспрессией биологических маркеров и поглощением F-фтордезоксиглюкозы при раке шейки матки, измеренная с помощью позитронно-эмиссионной томографии. Онкология 2013; 36: 169-74. [Crossref] [PubMed]
Bos R, van Der Hoeven JJ, van Der Wall E, et al. Биологические корреляты (18) поглощения фтордезоксиглюкозы при раке груди человека, измеренные с помощью позитронно-эмиссионной томографии. Дж. Клин Онкол 2002; 20: 379-87. [Crossref] [PubMed]
Xu H, Li B, Yu W и др. Корреляция между (1) (8) захватом F-FDG и экспрессией переносчика глюкозы-1 и индуцируемого гипоксией фактора-1альфа в трансплантированных опухолях VX2.Nucl Med Commun 2013; 34: 953-8. [Crossref] [PubMed]
Chiu CH, Yeh YC, Lin KH, et al. Гистологические подтипы аденокарциномы легких имеют дифференциальное (1) (8) поглощение F-фтордезоксиглюкозы при позитронно-эмиссионной томографии / компьютерной томографии. Дж. Торак Онкол 2011; 6: 1697-703. [Crossref] [PubMed]
Ятабэ Ю., Косака Т., Такахаши Т. и др. Мутация EGFR специфична для аденокарциномы терминального типа дыхательных единиц. Американский журнал хирургической патологии 2005; 29: 633-9.[Crossref] [PubMed]
Hsieh RK, Lim KH, Kuo HT, et al. Женский пол и бронхиолоальвеолярный патологический подтип предсказывают мутации EGFR при немелкоклеточном раке легкого. Сундук 2005; 128: 317-21. [Crossref] [PubMed]
Ханеда Х., Сасаки Х., Линдеман Н. и др. Корреляция между статусом мутации гена EGFR и особенностями бронхиолоальвеолярной карциномы у японских пациентов с аденокарциномой. Jpn J Clin Oncol 2006; 36: 69-75. [Crossref] [PubMed]
Ли Ю.Возможность CEA для выявления мутаций гена EGFR при немелкоклеточном раке легкого. Неопубликованная докторская диссертация, Даляньский медицинский университет 2010: 26-8.
Cappuzzo F, Magrini E, Ceresoli GL, et al. Фосфорилирование Akt и эффективность гефитиниба у пациентов с распространенным немелкоклеточным раком легкого. J Natl Cancer Inst 2004; 96: 1133-41. [Crossref] [PubMed]
Ordonez C, Screaton RA, Ilantzis C и др. Карциноэмбриональный антиген человека действует как общий ингибитор аноикиса.Cancer Res 2000; 60: 3419-24. [PubMed]

Цитируйте эту статью как: Gu J, Xu S, Huang L, Li S, Wu J, Xu J, Feng J, Liu B, Zhou Y. Значение сочетания карциноэмбрионального антигена сыворотки и ПЭТ / КТ в предсказании мутации EGFR при немелкоклеточном раке легкого. J Thorac Dis 2018; 10 (2): 723-731. doi: 10.21037 / jtd.2017.12.143

Коробчатые диаграммы | Введение в статистику

Результаты обучения

Отображение данных графически и интерпретация графиков: стволовых диаграмм, гистограмм и коробчатых диаграмм.
Распознавать, описывать и вычислять меры расположения данных: квартили и процентили.

Ящичковые диаграммы (также называемые прямоугольными диаграммами , или прямоугольными диаграммами ) дают хорошее графическое изображение концентрации данных. Они также показывают, насколько далеко крайние значения от большинства данных. Ящичковая диаграмма строится из пяти значений: минимального значения, первого квартиля, медианы, третьего квартиля и максимального значения.Мы используем эти значения, чтобы сравнить, насколько близки к ним другие значения данных.

Чтобы построить коробчатую диаграмму, используйте горизонтальную или вертикальную числовую линию и прямоугольную рамку. Наименьшие и наибольшие значения данных обозначают конечные точки оси. Первый квартиль отмечает один конец прямоугольника, а третий квартиль — другой конец. Примерно средних [латексных] 50 [/ латексных] процентов данных попадают в коробку . «Усы» простираются от концов прямоугольника до самого маленького и самого большого значений данных.Медиана или второй квартиль может находиться между первым и третьим квартилями, или может быть одним, или другим, или обоими. Ящичковая диаграмма дает хорошее и быстрое представление о данных.

Примечание

Вы можете встретить диаграммы типа «ящик-и-ус», на которых точки отмечают выбросы. В этих случаях усы не доходят до минимальных и максимальных значений.

Снова рассмотрим этот набор данных.

[латекс] 1 [/ латекс], [латекс] 1 [/ латекс], [латекс] 2 [/ латекс], [латекс] 2 [/ латекс], [латекс] 4 [/ латекс], [латекс] 6 [/ латекс], [латекс] 6.8 [/ латекс], [латекс] 7.2 [/ латекс], [латекс] 8 [/ латекс], [латекс] 8,3 [/ латекс], [латекс] 9 [/ латекс], [латекс] 10 [/ латекс] , [латекс] 10 [/ латекс], [латекс] 11,5 [/ латекс]

Первый квартиль — два, медиана — семь, а третий квартиль — девять. Наименьшее значение равно единице, а наибольшее значение — [латекс] 11,5 [/ латекс]. На следующем изображении показана построенная коробчатая диаграмма.

Примечание

См. Инструкции к калькулятору на веб-сайте TI.

Два уса простираются от первого квартиля до наименьшего значения и от третьего квартиля до наибольшего значения.Медиана показана пунктирной линией.

Примечание

Важно начинать прямоугольную диаграмму с масштабированной числовой линии . В противном случае коробчатая диаграмма может оказаться бесполезной.

Пример

Следующие данные — рост [latex] 40 [/ latex] студентов в классе статистики.

[латекс] 59 [/ латекс]; [латекс] 60 [/ латекс]; [латекс] 61 [/ латекс]; [латекс] 62 [/ латекс]; [латекс] 62 [/ латекс]; [латекс] 63 [/ латекс]; [латекс] 63 [/ латекс]; [латекс] 64 [/ латекс]; [латекс] 64 [/ латекс]; [латекс] 64 [/ латекс]; [латекс] 65 [/ латекс]; [латекс] 65 [/ латекс]; [латекс] 65 [/ латекс]; [латекс] 65 [/ латекс]; [латекс] 65 [/ латекс]; [латекс] 65 [/ латекс]; [латекс] 65 [/ латекс]; [латекс] 65 [/ латекс]; [латекс] 65 [/ латекс]; [латекс] 66 [/ латекс]; [латекс] 66 [/ латекс]; [латекс] 67 [/ латекс]; [латекс] 67 [/ латекс]; [латекс] 68 [/ латекс]; [латекс] 68 [/ латекс]; [латекс] 69 [/ латекс]; [латекс] 70 [/ латекс]; [латекс] 70 [/ латекс]; [латекс] 70 [/ латекс]; [латекс] 70 [/ латекс]; [латекс] 70 [/ латекс]; [латекс] 71 [/ латекс]; [латекс] 71 [/ латекс]; [латекс] 72 [/ латекс]; [латекс] 72 [/ латекс]; [латекс] 73 [/ латекс]; [латекс] 74 [/ латекс]; [латекс] 74 [/ латекс]; [латекс] 75 [/ латекс]; [латекс] 77 [/ латекс]

Постройте коробчатую диаграмму со следующими свойствами; инструкции калькулятора для минимальных и максимальных значений, а также квартилей следуют примеру.

Минимальное значение = [латекс] 59 [/ латекс]
Максимальное значение = [латекс] 77 [/ латекс]
Q 1: Первый квартиль = [латекс] 64,5 [/ латекс]
Q 2: Второй квартиль или медиана = [латекс] 66 [/ латекс]
Q 3: Третий квартиль = [латекс] 70 [/ латекс]

В каждом квартале содержится примерно [латекс] 25 [/ латекс]% данных.
Спрэды четырех четвертей [латекс] 64,5 — 59 = 5,5 [/ латекс] (первая четверть), [латекс] 66 — 64.5 = 1,5 [/ латекс] (вторая четверть), [латекс] 70 — 66 = 4 [/ латекс] (третья четверть) и [латекс] 77 — 70 = 7 [/ латекс] (четвертая четверть). Таким образом, у второго квартала самый маленький спред, а у четвертого квартала самый большой спред.
Диапазон = максимальное значение — минимальное значение = 77 — 59 = 18
Межквартильный диапазон: [латекс] IQR [/ latex] = [латекс] Q_3 [/ latex] — [латекс] Q_1 [/ latex] = [латекс] 70 — 64,5 = 5,5 [/ латекс].
Интервал [латекс] 59–65 [/ latex] содержит более [latex] 25 [/ latex]% данных, поэтому в нем больше данных, чем в интервале от [latex] 66 [/ latex] до [latex] 70 [/ latex], который имеет [latex] 25 [/ latex]% данных.
Среднее [латекс] 50 [/ латекс]% (средняя половина) данных имеет диапазон [латекс] 5,5 [/ латекс] дюймов.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ КАЛЬКУЛЯТОРА TI-83, 83+, 84, 84+

Чтобы найти минимум, максимум и квартили:

Введите данные в редактор списка (Pres STAT 1: EDIT). Если вам нужно очистить список, сделайте стрелку вверх до имени L1, нажмите CLEAR, а затем стрелку вниз.

Поместите значения данных в список L1.

Нажмите STAT и стрелку к CALC. Нажмите 1: 1-VarStats.Введите L1.

Нажмите ENTER.

Используйте клавиши со стрелками вниз и вверх для прокрутки.

Наименьшее значение = [латекс] 59 [/ латекс].

Наибольшее значение = [латекс] 77 [/ латекс].

[латекс] Q_1 [/ латекс]: первый квартиль = [латекс] 64,5 [/ латекс].

[латекс] Q_2 [/ латекс]: второй квартиль или медиана = [латекс] 66 [/ латекс].

[латекс] Q_3 [/ латекс]: Третий квартиль = [латекс] 70 [/ латекс].

Для построения коробчатой диаграммы:

Нажмите 4: Plotsoff. Нажмите Ввод.

Стрелка вниз и затем с помощью клавиши со стрелкой вправо перейдите к пятому изображению, которое представляет собой прямоугольную диаграмму. Нажмите Ввод.

Стрелка вниз к Xlist: нажмите 2-ю 1 для L1

Стрелка вниз к Freq: нажмите ALPHA. Нажмите 1.

Нажмите Масштаб. Нажмите 9: ZoomStat.

Нажмите TRACE и используйте клавиши со стрелками для изучения рамочной диаграммы.

Попробуйте

Следующие данные представляют собой количество страниц в книгах [latex] 40 [/ latex] на полке. Постройте коробчатую диаграмму с помощью графического калькулятора и укажите межквартильный размах.

[латекс] 136 [/ латекс]; [латекс] 140 [/ латекс]; [латекс] 178 [/ латекс]; [латекс] 190 [/ латекс]; [латекс] 205 [/ латекс]; [латекс] 215 [/ латекс]; [латекс] 217 [/ латекс]; [латекс] 218 [/ латекс]; [латекс] 232 [/ латекс]; [латекс] 234 [/ латекс]; [латекс] 240 [/ латекс]; [латекс] 255 [/ латекс]; [латекс] 270 [/ латекс]; [латекс] 275 [/ латекс]; [латекс] 290 [/ латекс]; [латекс] 301 [/ латекс]; [латекс] 303 [/ латекс]; [латекс] 315 [/ латекс]; [латекс] 317 [/ латекс]; [латекс] 318 [/ латекс]; [латекс] 326 [/ латекс]; [латекс] 333 [/ латекс]; [латекс] 343 [/ латекс]; [латекс] 349 [/ латекс]; [латекс] 360 [/ латекс]; [латекс] 369 [/ латекс]; [латекс] 377 [/ латекс]; [латекс] 388 [/ латекс]; [латекс] 391 [/ латекс]; [латекс] 392 [/ латекс]; [латекс] 398 [/ латекс]; [латекс] 400 [/ латекс]; [латекс] 402 [/ латекс]; [латекс] 405 [/ латекс]; [латекс] 408 [/ латекс]; [латекс] 422 [/ латекс]; [латекс] 429 [/ латекс]; [латекс] 450 [/ латекс]; [латекс] 475 [/ латекс]; [латекс] 512 [/ латекс]

Показать решение

[латекс] IQR [/ latex] = [латекс] 158 [/ латекс]

В этом видео объясняется, какие описательные статистические данные необходимы для создания графика ящиков и усов.

Для некоторых наборов данных наибольшее значение, наименьшее значение, первый квартиль, медиана и третий квартиль могут совпадать. Например, у вас может быть набор данных, в котором медиана и третий квартиль совпадают. В этом случае на диаграмме не будет пунктирной линии внутри прямоугольника, отображающего медиану. В правой части окна будут отображаться как третий квартиль, так и медиана. Например, если и наименьшее значение, и первый квартиль равны единице, медиана и третий квартиль — пять, а наибольшее значение — семь, прямоугольная диаграмма будет выглядеть так:

В этом случае, по крайней мере [латекс] 25 [/ латекс]% значений равны единице.Двадцать пять процентов значений находятся в диапазоне от одного до пяти включительно. По крайней мере [латекс] 25 [/ латекс]% значений равны пяти. Верхние [латекс] 25 [/ latex]% значений попадают в диапазон от пяти до семи включительно.

Пример

Результаты тестов на уроке статистики колледжа, проводимом в течение дня:

[латекс] 99 [/ латекс]; [латекс] 56 [/ латекс]; [латекс] 78 [/ латекс]; [латекс] 55,5 [/ латекс]; [латекс] 32 [/ латекс]; [латекс] 90 [/ латекс]; [латекс] 80 [/ латекс]; [латекс] 81 [/ латекс]; [латекс] 56 [/ латекс]; [латекс] 59 [/ латекс]; [латекс] 45 [/ латекс]; [латекс] 77 [/ латекс]; [латекс] 84.5 [/ латекс]; [латекс] 84 [/ латекс]; [латекс] 70 [/ латекс]; [латекс] 72 [/ латекс]; [латекс] 68 [/ латекс]; [латекс] 32 [/ латекс]; [латекс] 79 [/ латекс]; [латекс] 90 [/ латекс]

Очки за вечерние занятия по статистике в колледже:

[латекс] 98 [/ латекс]; [латекс] 78 [/ латекс]; [латекс] 68 [/ латекс]; [латекс] 83 [/ латекс]; [латекс] 81 [/ латекс]; [латекс] 89 [/ латекс]; [латекс] 88 [/ латекс]; [латекс] 76 [/ латекс]; [латекс] 65 [/ латекс]; [латекс] 45 [/ латекс]; [латекс] 98 [/ латекс]; [латекс] 90 [/ латекс]; [латекс] 80 [/ латекс]; [латекс] 84,5 [/ латекс]; [латекс] 85 [/ латекс]; [латекс] 79 [/ латекс]; [латекс] 78 [/ латекс]; [латекс] 98 [/ латекс]; [латекс] 90 [/ латекс]; [латекс] 79 [/ латекс]; [латекс] 81 [/ латекс]; [латекс] 25.5 [/ латекс]

Найдите наименьшее и наибольшее значения, медианное значение, а также первый и третий квартили для дневного класса.
Найдите наименьшее и наибольшее значения, медианное значение, а также первый и третий квартили для ночного класса.
Какой процент данных находится между наименьшим значением и первым квартилем для каждого набора данных? первый квартиль и медиана? медиана и третий квартиль? третий квартиль и наибольшее значение? Какой процент данных находится между первым квартилем и наибольшим значением?
Создайте коробчатую диаграмму для каждого набора данных.Используйте одну числовую линию для обеих коробчатых диаграмм.
Какой прямоугольный график имеет наибольший разброс для средних [латексных] 50 [/ латексных]% данных (данных между первым и третьим квартилями)? Что это означает для этого набора данных по сравнению с другим набором данных?

Показать решение

Решение:

Мин. = [Латекс] 32 [/ латекс]
[латекс] Q_1 [/ latex] = [латекс] 56 [/ латекс]
[латекс] M [/ латекс] = [латекс] 74,5 [/ латекс]
[латекс] Q_3 [/ латекс] = [латекс] 82.5 [/ латекс]
Макс. = [Латекс] 99 [/ латекс]

Мин. = [Латекс] 25,5 [/ латекс]
[латекс] Q_1 [/ latex] = [латекс] 78 [/ латекс]
[латекс] M [/ латекс] = [латекс] 81 [/ латекс]
[латекс] Q_3 [/ latex] = [латекс] 89 [/ латекс]
Макс. = [Латекс] 98 [/ латекс]

Дневной класс: Есть шесть значений данных в диапазоне от [латекс] 32 [/ латекс] до [латекс] 56 [/ латекс]: [латекс] 30 [/ латекс]%. Существует шесть значений данных в диапазоне от [латекс] 56 [/ латекс] до [латекс] 74.5 [/ латекс]: [латекс] 30 [/ латекс]%. Существует пять значений данных в диапазоне от [латекс] 74,5 [/ латекс] до [латекс] 82,5 [/ латекс]: [латекс] 25 [/ латекс]%. Существует пять значений данных в диапазоне от [латекс] 82,5 [/ латекс] до [латекс] 99 [/ латекс]: [латекс] 25 [/ латекс]%. Между первым квартилем, [latex] 56 [/ latex] и наибольшим значением, [latex] 99 [/ latex]: [latex] 75 [/ latex]%, находятся значения данных [latex] 16 [/ latex]. Ночной класс:

Первый набор данных имеет более широкий разброс для средних [латексных] 50 [/ латексных]% данных.IQR [латекса] [/ latex] для первого набора данных больше, чем IQR [латекса] [/ latex] для второго набора. Это означает, что в средних [латексных] 50 [/ латексных]% первом наборе данных больше вариаций.

Попробуйте

Следующий набор данных показывает рост в дюймах для мальчиков из класса [латекс] 40 [/ латекс] учеников.

[латекс] 66 [/ латекс]; [латекс] 66 [/ латекс]; [латекс] 67 [/ латекс]; [латекс] 67 [/ латекс]; [латекс] 68 [/ латекс]; [латекс] 68 [/ латекс]; [латекс] 68 [/ латекс]; [латекс] 68 [/ латекс]; [латекс] 68 [/ латекс]; [латекс] 69 [/ латекс]; [латекс] 69 [/ латекс]; [латекс] 69 [/ латекс]; [латекс] 70 [/ латекс]; [латекс] 71 [/ латекс]; [латекс] 72 [/ латекс]; [латекс] 72 [/ латекс]; [латекс] 72 [/ латекс]; [латекс] 73 [/ латекс]; [латекс] 73 [/ латекс]; [латекс] 74 [/ латекс]

Следующий набор данных показывает рост в дюймах для девочек из класса [латекс] 40 [/ латекс] учениц.

[латекс] 61 [/ латекс]; [латекс] 61 [/ латекс]; [латекс] 62 [/ латекс]; [латекс] 62 [/ латекс]; [латекс] 63 [/ латекс]; [латекс] 63 [/ латекс]; [латекс] 63 [/ латекс]; [латекс] 65 [/ латекс]; [латекс] 65 [/ латекс]; [латекс] 65 [/ латекс]; [латекс] 66 [/ латекс]; [латекс] 66 [/ латекс]; [латекс] 66 [/ латекс]; [латекс] 67 [/ латекс]; [латекс] 68 [/ латекс]; [латекс] 68 [/ латекс]; [латекс] 68 [/ латекс]; [латекс] 69 [/ латекс]; [латекс] 69 [/ латекс]; [латекс] 69 [/ латекс]

Постройте прямоугольную диаграмму с помощью графического калькулятора для каждого набора данных и укажите, какая прямоугольная диаграмма имеет более широкий разброс для средних [латексных] 50 [/ латексных]% данных.

Показать решение

[latex] IQR [/ latex] для мальчиков = [latex] 4 [/ latex]

[латекс] IQR [/ латекс] для девочек = [латекс] 5 [/ латекс]

Ящичковая диаграмма для роста девушек имеет более широкий разброс для средних [латекс] 50 [/ латекс]% данных.

, пример

Постройте график в виде прямоугольников и усов для показанных значений данных.

[латекс] 10 [/ латекс]; [латекс] 10 [/ латекс]; [латекс] 10 [/ латекс]; [латекс] 15 [/ латекс]; [латекс] 35 [/ латекс]; [латекс] 75 [/ латекс]; [латекс] 90 [/ латекс]; [латекс] 95 [/ латекс]; [латекс] 100 [/ латекс]; [латекс] 175 [/ латекс]; [латекс] 420 [/ латекс]; [латекс] 490 [/ латекс]; [латекс] 515 [/ латекс]; [латекс] 515 [/ латекс]; [латекс] 790 [/ латекс]

Пять чисел, использованных для построения графика ящика и уса:

Мин .: [латекс] 10 [/ латекс]
[латекс] Q_1 [/ латекс]: [латекс] 15 [/ латекс]
Med: [латекс] 95 [/ латекс]
[латекс] Q_3 [/ латекс]: [латекс] 490 [/ латекс]
Макс: [латекс] 790 [/ латекс]

На следующем графике показан график «ящик и усы».

Попробуйте

Следуйте инструкциям, которые вы использовали для построения графика в виде квадратиков и усов для показанных значений данных.

[латекс] 0 [/ латекс]; [латекс] 5 [/ латекс]; [латекс] 5 [/ латекс]; [латекс] 15 [/ латекс]; [латекс] 30 [/ латекс]; [латекс] 30 [/ латекс]; [латекс] 45 [/ латекс]; [латекс] 50 [/ латекс]; [латекс] 50 [/ латекс]; [латекс] 60 [/ латекс]; [латекс] 75 [/ латекс]; [латекс] 110 [/ латекс]; [латекс] 140 [/ латекс]; [латекс] 240 [/ латекс]; [латекс] 330 [/ латекс]

Показать решение

Данные расположены в порядке от наименьшего к наибольшему. Имеется значение [latex] 15 [/ latex], поэтому восьмое число по порядку является медианным: [latex] 50 [/ latex].Слева от медианы записаны семь значений данных, а справа от значений [latex] 7 [/ latex]. Пять значений, которые используются для создания коробчатой диаграммы:

Мин .: [латекс] 0 [/ латекс]
[латекс] Q_1 [/ латекс]: [латекс] 15 [/ латекс]
Med: [латекс] 50 [/ латекс]
[латекс] Q_3 [/ латекс]: [латекс] 110 [/ латекс]
Макс: [латекс] 330 [/ латекс]

Обзор концепции

Коробчатые диаграммы — это тип графиков, которые помогают визуально систематизировать данные.Для построения прямоугольной диаграммы необходимо вычислить следующие точки данных: минимальное значение, первый квартиль, медиана, третий квартиль и максимальное значение. После того, как ящичковая диаграмма построена, вы можете отображать и сравнивать распределения данных.

Список литературы

Данные из журнала West Magazine .

Дополнительные ресурсы

Используйте онлайн-инструмент imathAS box plot для создания коробчатых и усовидных диаграмм.

Новые предсказания возникают из противоречий | Genome Biology

Многие ученые и широкая общественность обеспокоены «кризисом воспроизводимости» в науке: наблюдение, что многие опубликованные результаты не могут быть воспроизведены [27].Хотя может показаться соблазнительным возложить вину на избранную группу непослушных людей, широкий диапазон наблюдаемой невоспроизводимости предполагает, что это может быть пагубным аспектом самого научного процесса [27].

В качестве ориентира полезно выделить одну научную основу, которая избежала кризиса воспроизводимости: клинические испытания. Признание и исправление потенциальных предубеждений встроено в жесткий процесс клинических испытаний, где дизайн исследований предварительно регистрируется, а подробные протоколы должны строго соблюдаться.Смешивающие переменные четко определены априори, данные не учитываются, чтобы исключить потенциальные предубеждения практиков, а значимость проверяется только после того, как будет собран заранее заданный набор данных. Клинические испытания тщательно спланированы так, чтобы проводиться исключительно в режиме проверки гипотез; если они выполняются с достаточно большим размером выборки, они должны быть защищены не только от систематической ошибки подтверждения, но и от других источников систематической невоспроизводимости.

В отличие от обычного режима проверки гипотез в клинических испытаниях, проекты фундаментальных исследований обычно не полностью знают, чего ожидать от данных перед их анализом — в конце концов, «если бы мы знали, что делаем, этого бы не произошло». Разве это исследование, не так ли? » Наборы данных с высокой пропускной способностью особенно часто содержат информацию, которой не предвиделось при их создании, — наблюдения, которые нельзя было предсказать априори; по этой причине мы часто можем быть лучше подготовлены к открытию, если поговорим с набором данных, не сформулировав конкретной гипотезы [28].Естественное место почти для каждого набора данных находится прямо в середине разговора о данных и гипотезах [29, 30], где он используется как для проверки гипотез, так и в исследованиях, которые ищут неожиданные закономерности [31], семена будущие гипотезы.

Возможно, центральная часть научного метода состоит в том, чтобы оспорить гипотезу путем сопоставления ее прогнозов с данными. Но когда мы это делаем, мы обычно боимся, что фальсификация не удастся: если мы не проверяем чью-то конкурирующую гипотезу, мы надеемся — и часто ожидаем, — что наши прогнозы подтвердятся.Если результаты изначально не совпадают, мы будем думать о проблемах с экспериментом или о дополнительных предположениях (например, о том, как мы ожидаем, что генетическая манипуляция нарушит клеточную систему). Иногда мы выявляем несколько таких проблем, и результаты могут совпадать с тем, что мы прогнозировали. В принципе, в этом общем подходе нет ничего плохого: научный процесс — это метод проб и ошибок, и мы не можем ожидать, что первоначальный эксперимент и наш первый анализ прошли без ошибок.Очевидно, мы должны быть осторожны, чтобы выборочно не исключить противоречивые данные, убедившись, что похожие ошибки не повлияли в равной степени на другие точки данных. Однако здесь есть более тонкий момент, более дискретный способ, которым предвзятость подтверждения может проникнуть в нашу науку. Наши человеческие инстинкты приведут к чувству удовлетворения, как только ожидаемый образец, наконец, проявится. Хотя это может означать идеальное время для заслуженного перерыва на кофе, это не время, когда нам следует прекращать анализ данных.Вместо этого мы должны продолжать думать о возможных предубеждениях и ошибках в нашем эксперименте, его анализе и его интерпретации. Если мы этого не сделаем, возможно, мы слишком рано откажемся от наших попыток фальсификации.

Одним из крайних примеров, когда предвзятость подтверждения возводится в руководящий принцип, является p-hacking [32]: один изменяет особенности анализа до тех пор, пока не появится ожидаемый результат, впоследствии сообщая только окончательную конфигурацию. Однако важно понимать, что в данном случае именно предвзятая отчетность способствует кризису воспроизводимости, а не сам исследовательский анализ [33].Как раз наоборот: исследование того, как наши результаты меняются с изменениями в специфике анализа, если сообщается открыто, дает важную информацию о надежности нашей интерпретации.

Изящный способ противостоять тяги к самореализующимся гипотезам — это проверить не одну, а несколько альтернативных гипотез, ключевой элемент метода, который Джон Платт назвал «сильным выводом» [34]. Платт утверждал, что самый быстрый научный прогресс является результатом формулирования набора противоположных гипотез и затем разработки теста, который может различать их.Хотя это действительно мощный подход, мы часто изначально не знаем, какой набор конкурирующих гипотез может быть лучшим. Заставить себя выйти за рамки одной предпочитаемой гипотезы, чтобы выдвинуть такие конкурирующие гипотезы, — серьезная — и неинтересная — ночная научная задача, требующая тяжелой и целенаправленной работы.

Ингибирование лизилоксидазы за счет регенерации кортизола в человеческом амнионе: последствия для разрыва плодных оболочек | Эндокринология

Механизмы, лежащие в основе человеческих родов, до сих пор не изучены, но нам необходимы эти знания для борьбы с преждевременными родами.Мембраны плода в большом количестве экспрессируют 11β-гидроксистероид дегидрогеназу 1 (11β-HSD1), которая превращает инертный кортизон в активный кортизол. Мы исследовали, может ли регенерация кортизола в амнионе играть роль в родах человека за счет регуляции лизилоксидазы (LOX), фермента, сшивающего коллаген, тем самым способствуя разрыву плодных оболочек. Используя культивированные человеческие первичные фибробласты амниона, мы продемонстрировали, что, помимо индукции ключевых ферментов, участвующих в синтезе простагландина E2 (PGE2), кортизол стимулировал 11β-HSD1 и взаимно ингибировал LOX.Эти результаты были воспроизведены на эксплантатах ткани амниона человека после лечения кортизолом. Кортизон также подавлял экспрессию LOX, которая устранялась ингибированием 11β-HSD1. Несмотря на ингибирование LOX PGE2, ингибирование пути PGE2 не смогло блокировать ингибирование LOX кортизолом. Однако ингибирование рецептора глюкокортикоидов и мутация отрицательного элемента ответа на глюкокортикоиды в промоторе LOX отменяют ингибирование LOX кортизолом. Анализ иммунопреципитации хроматина показал, что кортизол увеличивает связывание GR с промотором LOX.Более того, повышенное содержание кортизола и 11β-HSD1 и снижение содержания LOX наблюдались в ткани амниона человека после инициированного родами спонтанного разрыва оболочек. Эти данные подчеркивают решающую роль локальной регенерации кортизола с помощью 11β-HSD1 в подавлении экспрессии LOX посредством связывания глюкокортикоидного рецептора с отрицательным элементом глюкокортикоидного ответа на его промотор в амнионе, что может способствовать разрыву плодных оболочек во время родов.

Широко признано, что глюкокортикоиды, полученные из надпочечников плода, вызывают роды у ряда видов животных (1–4).Однако роль глюкокортикоидов в родах у человека не так четко определена, и, действительно, вопрос о том, играют ли они вообще роль, был спорным (5, 6). Положение человека осложняется уникальной функцией надпочечников плода, которые во время беременности вырабатывают в основном дегидроэпиандростерон, а не глюкокортикоиды (7). Вместо этого было обнаружено, что плодные оболочки являются богатым источником глюкокортикоидов во время беременности человека (8, 9) из-за обильной экспрессии 11β-гидроксистероиддегидрогеназы (11β-HSD) -1, которая превращает биологически неактивный кортизон в активный кортизол, и отсутствие 11β-HSD 2, который превращает кортизол в кортизон (10).Более любопытно, что кортизол индуцирует экспрессию 11β-HSD1 в плодных оболочках с прямой связью (11, 12). Это может объяснить увеличение содержания 11β-HSD1 в плодных оболочках с гестационным возрастом (13). Поэтому было высказано предположение, что оболочки плода могут действовать как экстраадреналовый источник кортизола на поздних сроках беременности (8). В настоящее время неясно, играет ли эта прямая регенерация кортизола с помощью 11β-HSD1 в плодных оболочках аналогичную роль в родах человека, как глюкокортикоиды у других видов животных.В настоящее время имеются данные, позволяющие предположить, что кортизол, полученный в результате этой регенерации с прямой связью, сильно индуцирует ферменты, участвующие в синтезе простагландина (PG) E2 и PGF2α в фибробластах амниона человека (14-19). Поскольку PGE2 и PGF2α участвуют в созревании шейки матки и сокращении миометрия, считается, что эти эффекты кортизола на синтез простагландинов имеют отношение к родам человека (20). Однако остается неизвестным, участвует ли это накопление кортизола с прямой связью в других инициирующих роды событиях, помимо индукции синтеза простагландинов.

Хорошо известно, что разрыв плодных оболочек (ROM) может вызвать роды (21). Преждевременный преждевременный разрыв плодных оболочек (PPROM) считается одной из основных причин преждевременных родов, которая ежегодно вызывает миллионы неонатальных смертей и инвалидностей во всем мире (22, 23). Выяснение механизма, лежащего в основе ROM, может не только помочь понять механизм родов у человека, но также выявить эффективные стратегии предотвращения PPROM, тем самым снижая частоту преждевременных родов.

Оболочки плода человека состоят из двух слоев: амниона и хориона. Известно, что из этих двух слоев амнион сильнее хориона и обеспечивает наиболее значительную прочность на разрыв мембран (24). Под эпителием амниона лежит компактный мезенхимальный слой, обеспечивающий наибольшую прочность на разрыв (21, 25, 26). Считается, что разрыв плодных оболочек в значительной степени связан с ремоделированием внеклеточного матрикса (ЕСМ) амниона посредством запрограммированной гибели эпителиальных клеток и разрушения компактного мезенхимального слоя, хотя механические силы также могут играть роль (21, 27).Мезенхимальный слой представляет собой сеть из поперечно сшитых коллагеновых фибрилл, которые необходимы для поддержания целостности амниона (26, 28). Сшитые коллагены не только повышают прочность на разрыв мембран, но и препятствуют разрушению матриксными металлопротеиназами (29, 30). Внутри сети коллагеновых фибрилл находятся фибробласты, которые в большом количестве экспрессируют 11β-HSD1 (10, 11), коллаген (28) и лизилоксидазу (LOX) (31, 32), фермент, связывающий коллагены. Было показано, что белок LOX и ферментативная активность в амнионе резко снижаются с увеличением срока беременности (31), что может вызвать разборку коллагенов перед ROM при родах.Однако причинные факторы для подавления LOX к концу беременности остаются неуловимыми.

Повышенная экспрессия 11β-HSD1 и избыток глюкокортикоидов были связаны с возрастной атрофией кожи (33), которая в значительной степени объясняется неблагоприятным воздействием чрезмерного количества глюкокортикоидов на целостность коллагена. Учитывая уникальную прямую функцию регенерации кортизола в плодных оболочках (8, 9, 11, 12) и связь повышенной регенерации кортизола с атрофией кожи (33), мы предполагаем, что прямое накопление кортизола в плодных оболочках мембраны могут быть причинным фактором для подавления экспрессии LOX к концу беременности, тем самым снижая прочность мембран на разрыв и приводя к ROM и родам.Здесь мы проверили эту гипотезу на человеческом амнионе.

Материалы и методы

Сбор плодных оболочек человека

Плодные оболочки человека были получены в результате неосложненных доношенных (37-40 недель) беременностей после планового кесарева сечения без родов (срок внебрачных родов [TNL], n = 70) или после родов через естественные родовые пути со спонтанной ROM (срочные роды [TL], n = 23 ). Письменное информированное согласие было получено от пациентов в соответствии с протоколом, одобренным Комитетом по этике больницы Рен Цзи Медицинской школы Шанхайского университета Цзяо Тонг.Беременности с такими осложнениями, как преэклампсия, задержка роста плода, гестационный диабет и хориоамнионит, были исключены из этого исследования. Поскольку нет различий между полами в отношении регуляции LOX и 11β-HSD1 кортизолом, в этом исследовании использовались плодные мембраны обоих полов.

Извлечение и измерение кортизола в ткани амниона

Ткань амниона растирали в жидком азоте и экстрагировали этилацетатом.После выпаривания экстракт восстанавливали в буфере для анализа и затем измеряли с помощью набора для иммуноанализа кортизола (R&D Systems) в соответствии с протоколом, предоставленным производителем. Согласно инструкции производителя, перекрестная реактивность этого набора следующая: прогестерон 1,7%; кортизон 0,2%; и кортикостерон и эстрадиол менее 0,1%.

Приготовление и культивирование эксплантатов ткани амниона

После отделения хориона свежий амнион из TNL был промыт PBS, содержащим 1% антибиотиков, для удаления остаточной крови и нарезан на круги с помощью 6-миллиметрового перфоратора для биопсии кожи.Диски с амнионом помещали во вставки для культур клеток Falcon в шестилуночный планшет и культивировали в среде DMEM / F12, содержащей 10% фетальной телячьей сыворотки (FBS) и 1% антибиотиков, в течение 24 часов перед обработкой кортизолом (1 мкМ; Sigma) в бессывороточная среда в течение 24 часов. После обработки тканевый белок экстрагировали для измерения 11β-HSD1 и LOX с помощью вестерн-блоттинга.

Выделение и культивирование эпителиальных клеток и фибробластов амниона

Эпителиальные клетки амниона человека и фибробласты выделяли из свежего амниона TNL, как описано ранее (11).Вкратце, ткань амниона переваривали 0,125% трипсина, а затем тщательно промывали физиологическим раствором. Эпителиальные клетки собирали после переваривания трипсином и промываний нормальным физиологическим раствором центрифугированием. Оставшуюся ткань переваривали 0,1% коллагеназой для сбора фибробластов центрифугированием. Выделенные клетки амниона культивировали в среде DMEM, содержащей 10% FBS плюс 1% антибиотиков.

Лечение амнионных клеток

Через три дня после посева клетки обрабатывали кортизолом и кортизоном или PGE2 в среде без FBS в течение 24 часов.Первоначально влияние кортизола на экспрессию 11β-HSD1 и LOX измеряли как в эпителиальных, так и в фибробластных клетках амниона. Позже для изучения механизма были использованы только фибробласты. Чтобы изучить участие 11β-HSD1 в регуляции LOX, фибробласты обрабатывали кортизоном (5 мкМ; Sigma) в присутствии или в отсутствие ингибитора 11β-HSD1 карбеноксолона (CBX; 1 мкМ; Sigma) или 10j (1 мкМ; Millipore) или нокдаун 11β-HSD1, опосредованный малой интерферирующей РНК (миРНК) (GenePharma Co). Чтобы проверить, опосредуется ли влияние кортизола на экспрессию LOX с помощью PGE2, сначала было подтверждено влияние кортизола на содержание цитозольной фосфолипазы A2α (cPLA2α) и циклооксигеназы-2 (COX-2), ключевых ферментов в синтезе простаноидов.Затем фибробласты обрабатывали кортизолом (1 мкМ) или PGE2 (1 мкМ; Cayman Chemical) в течение 24 часов в присутствии или в отсутствие NS398 (ингибитор COX-2, 10 мкМ; Beyotime Biotechnology) или комбинацией PF04418948 (простагландин E2). антагонист рецептора 2 (EP-2), 10 мкМ; Cayman Chemical) и L161982 (антагонист EP4, 10 мкМ; Cayman Chemical), H89 (ингибитор протеинкиназы A [PKA], 10 мкМ; Sigma) или SQ22536 (ингибитор аденилилциклазы. , 10 мкМ; Sigma). Чтобы изучить роль глюкокортикоидного рецептора (GR) в регуляции экспрессии LOX, фибробласты обрабатывали кортизолом (1 мкМ) в течение 24 часов в присутствии или в отсутствие RU486 (антагонист GR, 1 мкМ; Sigma) или siRNA-опосредованного нокдауна. ГР.

Трансфекция миРНК в клетки амниона с электропорацией

Для изучения роли 11β-HSD1 и GR в ингибировании LOX глюкокортикоидами фибробласты трансфицировали 50 нМ миРНК (GenePharma) против 11β-HSD1 (5′-CACCAACACUUCUUUGAAUtt-3 ‘) или GR (5’-GCAGCCAGAUCAUG 3 ‘) или случайно скремблированную миРНК (5′-UUCUCCGAACGUGUCACGUtt-3’) с электропоратором при 175 В в течение 5 миллисекунд по протоколу, как описано ранее (34). Клетки инкубировали в среде DMEM, содержащей 10% FBS, в течение 48 часов перед обработкой стероидами.

Иммунофлуоресцентное окрашивание LOX и 11β-HSD1 в мембранах плода и клетках амниона

Плодные мембраны, эпителиальные клетки амниона и фибробласты фиксировали в параформальдегиде. Залитые парафином срезы ткани и клетки амниона были проницаемы с 0,2% Triton X-100. После блокирования применяли антитела против 11β-HSD1 (Origene), LOX (Abcam), цитокератин (Santa Cruz Biotechnology) и виментин (Santa Cruz Biotechnology) в разведениях 1: 100. После промывки PBS наносили Alexa Fluor 488- (зеленый цвет), Cy3- (оранжевый цвет) и вторичные антитела, меченные Alexa Fluor 594 (1: 100; Proteintech).Ядра контрастировали 4 ‘, 6’-диамино-2-фенилиндолом (DAPI; синий цвет) (1 мкг / мл). Для определения специфичности иммунофлуоресцентного окрашивания вместо первичных антител применяли преиммунную сыворотку

Вестерн-блоттинг

Гомогенизированные измельченные ткани и клетки лизировали в ледяном буфере для лизиса для анализа радиоиммунного преципитации (Active Motif), содержащем коктейль ингибиторов протеаз (Sigma). После центрифугирования белок собирали для анализа вестерн-блоттингом, как описано ранее (34), с первичными антителами против 11β-HSD1 (Abcam), LOX (Abcam), cPLA2α (Santa Cruz Biotechnology) и COX-2 (Santa Cruz Biotechnology). в разведениях 1: 500.Контроли внутренней нагрузки зондировали антителом к глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназе (GAPDH) (1:10 000; Proteintech).

Количественная ПЦР в реальном времени (qRT-PCR)

Полную клеточную РНК экстрагировали и обратно транскрибировали в кДНК с использованием коммерческого набора (TaKaRa). Количество мРНК LOX определяли с помощью qRT-PCR с использованием транскрибированной выше кДНК и питания SYBR Premix Ex Taq ^T (TaKaRa) в соответствии с протоколом, описанным ранее (34).Абсолютную мРНК в каждом образце рассчитывали согласно стандартной кривой, построенной с использованием серийных разведений известных количеств конкретных матриц против соответствующих пороговых значений цикла. Ген домашнего хозяйства GAPDH амплифицировали параллельно в качестве внутреннего контроля загрузки. Последовательности праймеров, используемые для qRT-PCR, показаны в дополнительной таблице 1.

Анализ активности LOX

Ткань амниона измельчали в жидком азоте и затем гомогенизировали на льду в 0.15 М NaCl на 0,1 М натрий-фосфатный буфер. После центрифугирования осадок ресуспендировали в 6 М мочевине в 10 мМ натрий-фосфатном буфере и снова центрифугировали. Затем собирали супернатант для анализа активности LOX. Активность LOX в культуральной среде измеряли непосредственно без экстракции. Набор для флуориметрического анализа лизилоксидазы Amplite (AAT Bioquest Inc) использовали в соответствии с протоколом, предоставленным производителем. Вкратце, 50 мкл среды для экстракции тканей или культуральной среды добавляли к реакционной смеси, содержащей пероксидазу хрена и субстрат пероксидазы хрена Amplite в присутствии или в отсутствие β-аминопропионитрила (BAPN; 500 мкМ; Sigma), специфического ингибитора семейства LOX, чтобы инкубируйте 30 минут при 37 ° C при медленном встряхивании в темноте.Флуоресценцию измеряли с помощью планшет-ридера (TECAN) при возбуждении / испускании = 540/590 нм. Активность LOX получали вычитанием значения флуоресценции с BAPN из значения без BAPN. Пустой буфер для лизиса или культуральную среду без инкубации с клетками использовали для определения фоновой флуоресценции, соответственно, для измерения активности LOX в ткани и культуральной среде.

Конструирование человеческого репортерного гена люциферазы, управляемого промотором

LOX человека в плазмиде pGL3-энхансера

Промоторные области LOX , охватывающие от -850 п.н. до примерно +126 п.н. и от -450 п.н. до примерно +126 п.н., амплифицировали с помощью ПЦР с прямым и обратным праймерами, несущими сайты узнавания для рестрикционных ферментов Kpn I и Bgl . II.После переваривания рестрикционным ферментом амплифицированные промоторные области лигировали в плазмиду pGL3-энхансера. Анализ in silico с помощью программного обеспечения Genomatix выявил предполагаемый отрицательный элемент ответа на глюкокортикоиды (nGRE) в промоторной области LOX между -260 п.н. и примерно -252 п.н. Чтобы изучить этот предполагаемый nGRE в регуляции экспрессии LOX , в этот предсказанный nGRE были введены нуклеотидные мутации с использованием набора для сайт-направленного мутагенеза Q5 (New England Biolabs Inc) в соответствии с протоколом, предоставленным производителем.Чтобы проверить, был ли эффект мутаций специфическим, мутации также вводили в соседний предполагаемый элемент цАМФ-ответа от -332 п.н. до примерно -325 п.н. Праймеры, использованные в конструкции, показаны в дополнительной таблице 1.

Трансфекция плазмидой-энхансером pGL3, несущей промоторный репортерный ген люциферазы

LOX , и измерение активности репортерного гена

Для изучения регуляции активности промотора LOX фибробласты амниона котрансфицировали 0.5 мкг / лунка сконструированной плазмиды pGL3-энхансера, несущей промотор LOX , и 0,05 мкг / лунку плазмиды pSV-β-галактозидазы с использованием электропорации, как описано выше. Чтобы проверить эффективность трансфекции, флуоресцентные олигонуклеотиды Alex Fluor Red были трансфицированы в тех же условиях, что показало, что было трансфицировано более 90% клеток. Фибробласты культивировали в среде DMEM, содержащей 10% FBS и 1% антибиотиков, в течение 48 часов перед обработкой стероидами в течение 24 часов. После обработки клетки лизировали для измерения активности люциферазы и активности β-галактозидазы с использованием системы анализа люциферазы и системы анализа фермента β-галактозидазы (Promega) соответственно.Отношение управляемой промотором LOX активности люциферазы к активности β-галактозидазы было получено для корректировки эффективности трансфекции в каждой лунке.

Анализ иммунопреципитации хроматина

Обогащение GR промотором LOX после обработки кортизолом (1 мкМ) или без него в течение 24 часов измеряли с помощью анализа иммунопреципитации хроматина (ChIP), как описано ранее (34). Вкратце, после сшивания с 1% формальдегидом фибробласты амниона лизировали 1% буфером для лизиса додецилсульфата натрия, содержащим смесь ингибиторов протеаз.Лизированные клетки обрабатывали ультразвуком, чтобы разрезать ДНК хроматина до размеров около 500 п.н., которую иммунопреципитировали антителом GR (Abcam) или преиммунным IgG. Иммунопреципитат удаляли с помощью магнитных шариков агарозы Magna ChIP Protein A + G (Millipore) на магнитной подставке. После обратного перекрестного связывания белок и РНК удаляли протеиназой К и РНКазой. Разрезанную ДНК экстрагировали для анализа с помощью qRT-PCR. Последовательности праймеров для ChIP проиллюстрированы в дополнительной таблице 1. Такое же количество разрезанной ДНК без преципитации антител после обратного перекрестного связывания служило входным контролем.Отношение ДНК, осажденной антителом GR к входному контролю, было получено, чтобы указать количество связанного GR.

Статистический анализ

Все данные представлены как среднее ± SEM. Номер каждого исследования представляет собой отдельные эксперименты с использованием клеток амниона, полученных от разных беременностей. После проверки на нормальное распределение проводили статистический анализ с помощью парного или непарного теста Стьюдента t или одностороннего теста ANOVA с последующим тестом множественного сравнения Ньюмана-Кеулса, где это необходимо.Значимость была установлена на P ≤ 0,05.

Результаты

Изменения активности 11β-HSD1, кортизола и LOX в ткани амниона человека при родах

Значительное увеличение белка 11β-HSD1 и кортизола было замечено в ткани амниона TL по сравнению с тканью амниона TNL (рис. 1A). Напротив, активность LOX была значительно снижена в группе TL по сравнению с группой TNL (рис. 1B). Эти данные предполагают, что возможная связь между регенерацией кортизола с помощью 11β-HSD1 и подавлением изобилия LOX может существовать в амнионе во время родов.

Рисунок 1

Изменения 11β-HSD1, кортизола и LOX в ткани амниона человека при родах и реципрокная регуляция 11β-HSD1 и LOX кортизолом в эксплантатах ткани амниона человека. A и B, Сравнение активности белка 11β-HSD1, кортизола (A) и LOX (B) между тканями амниона, собранными в срок после планового кесарева сечения (TNL), и после родов через естественные родовые пути со спонтанным ROM (TL) (n = 7 для 11β-HSD1, n = 6 для LOX и n = 10 для кортизола). C. Влияние кортизола (1 мкМ) на содержание белка 11β-HSD1 и LOX в культивируемых эксплантатах ткани амниона человека (n = 3).Верхние панели A и C представляют собой репрезентативные иммуноблоты. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводился с использованием непарного (A и B) и парного (C) теста Стьюдента t . *, P <0,05, **, P <0,01 по сравнению с нерабочим или контрольным.

Рисунок 1

Изменения 11β-HSD1, кортизола и LOX в ткани амниона человека при родах и реципрокная регуляция 11β-HSD1 и LOX кортизолом в эксплантатах ткани амниона человека. A и B, Сравнение активности белка 11β-HSD1, кортизола (A) и LOX (B) между тканями амниона, собранными в срок после планового кесарева сечения (TNL), и после родов через естественные родовые пути со спонтанным ROM (TL) (n = 7 для 11β-HSD1, n = 6 для LOX и n = 10 для кортизола).C. Влияние кортизола (1 мкМ) на содержание белка 11β-HSD1 и LOX в культивируемых эксплантатах ткани амниона человека (n = 3). Верхние панели A и C представляют собой репрезентативные иммуноблоты. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводился с использованием непарного (A и B) и парного (C) теста Стьюдента t . *, P <0,05, **, P <0,01 по сравнению с нерабочим или контрольным.

Влияние кортизола на содержание 11β-HSD1, LOX в эксплантатах ткани амниона человека

Обработка эксплантатов ткани амниона кортизолом (1 мкМ) увеличивала содержание 11β-HSD1 и одновременно снижала содержание белка LOX (рис. 1C).Поскольку эпителиальные клетки и фибробласты являются двумя основными типами клеток амниона, мы дополнительно исследовали, связаны ли наблюдаемые изменения со специфическим действием кортизола в одном конкретном типе клеток.

Распределение LOX и 11β-HSD1 в плодных оболочках человека и эффекты кортизола в эпителиальных клетках амниона и фибробластах человека

Иммунофлуоресцентное окрашивание плодных мембран человека показало, что 11β-HSD1 и LOX совместно локализованы в эпителиальных клетках амниона, фибробластах и трофобластах хориона (рис. 2, A – C), что позволяет предположить, что кортизол, регенерированный 11β-HSD1, может влиять на экспрессию 11β-HSD1 и LOX. паракринным или аутокринным образом.Иммуноцитохимическое окрашивание культивируемых клеток показало, что в отличие от широко распространенного распространения LOX в фибробластах амниона, только спорадические эпителиальные клетки окрашиваются положительно на LOX (рис. 2D). Дальнейшее исследование показало, что количество активности LOX (Рисунок 2D) и белка (Рисунок 2E) также было намного больше в фибробластах амниона, чем в эпителиальных клетках, хотя количество белка 11β-HSD1 было сопоставимо между этими двумя типами клеток (Рисунок 2E). . Более того, кортизол (1 мкМ) реципрокно увеличивал белок 11β-HSD1 (рис. 2E) и снижал активность LOX (рис. 2D) и белка (рис. 2E) в фибробластах амниона, но не в эпителиальных клетках (рис. 2E), что указывает на связь между регенерация кортизола и подавление LOX только в фибробластах амниона.Таким образом, основной механизм был дополнительно исследован на фибробластах.

Рисунок 2

Распределение LOX и 11β-HSD1 в плодных оболочках человека и эффекты кортизола в эпителиальных и фибробластных клетках амниона человека. A – C, Иммунофлуоресцентное окрашивание 11β-HSD1 (A, оранжевый) и LOX (B, зеленый) в плодных оболочках человека. Желтый цвет после слияния представляет собой совместную локализацию 11β-HSD1 и LOX (C). Ядра окрашивали в синий цвет с помощью DAPI. Шкала 10 мкм.D, Иммунофлуоресцентное окрашивание активности LOX и LOX в культивируемых эпителиальных и фибробластных клетках амниона. Верхняя панель представляет собой двойное окрашивание LOX (зеленый) и виментин (красный) в фибробластах амниона и LOX (зеленый) и цитокератин (красный) в эпителиальных клетках амниона. Ядра окрашивали в синий цвет с помощью DAPI. Стрелки указывают на эпителиальные клетки амниона, положительно окрашенные на LOX. Шкала 10 мкм. На нижней панели показано влияние кортизола (1 мкМ) на активность LOX в фибробластах амниона и эпителиальных клетках (n = 3).E. Взаимные эффекты кортизола (1 мкМ) на содержание белков 11β-HSD1 и LOX в эпителиальных клетках амниона и фибробластах человека. F – H, иммунофлуоресцентное двойное окрашивание 11β-HSD1 (F, оранжевый) и LOX (G, зеленый) в фибробластах амниона человека. Ядра окрашивали в синий цвет с помощью DAPI. Желтый цвет после слияния представляет собой совместную локализацию 11β-HSD1 и LOX (H). Шкала 10 мкм. I и J, Зависимая от концентрации индукция 11β-HSD1 (I, n = 5) и уменьшение LOX (J, n = 5 для мРНК, n = 7 для белка) кортизолом (0.01–1 мкМ) в фибробластах амниона человека. Верхние панели E, I и J представляют собой репрезентативные иммуноблоты. ае — эпителиальные клетки амниона; af — фибробласты амниона; ct, трофобласты хориона. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводили с помощью парного теста Стьюдента t (E и K) или одностороннего теста ANOVA (I и J). *, P <0,05, **, P <0,01, ***, P <0,001 по сравнению с контролем или 0 мкМ.

Рисунок 2

Распределение LOX и 11β-HSD1 в плодных оболочках человека и эффекты кортизола в эпителиальных клетках амниона и фибробластах человека.A – C, Иммунофлуоресцентное окрашивание 11β-HSD1 (A, оранжевый) и LOX (B, зеленый) в плодных оболочках человека. Желтый цвет после слияния представляет собой совместную локализацию 11β-HSD1 и LOX (C). Ядра окрашивали в синий цвет с помощью DAPI. Шкала 10 мкм. D, Иммунофлуоресцентное окрашивание активности LOX и LOX в культивируемых эпителиальных и фибробластных клетках амниона. Верхняя панель представляет собой двойное окрашивание LOX (зеленый) и виментин (красный) в фибробластах амниона и LOX (зеленый) и цитокератин (красный) в эпителиальных клетках амниона.Ядра окрашивали в синий цвет с помощью DAPI. Стрелки указывают на эпителиальные клетки амниона, положительно окрашенные на LOX. Шкала 10 мкм. На нижней панели показано влияние кортизола (1 мкМ) на активность LOX в фибробластах амниона и эпителиальных клетках (n = 3). E. Взаимные эффекты кортизола (1 мкМ) на содержание белков 11β-HSD1 и LOX в эпителиальных клетках амниона и фибробластах человека. F – H, иммунофлуоресцентное двойное окрашивание 11β-HSD1 (F, оранжевый) и LOX (G, зеленый) в фибробластах амниона человека. Ядра окрашивали в синий цвет с помощью DAPI.Желтый цвет после слияния представляет собой совместную локализацию 11β-HSD1 и LOX (H). Шкала 10 мкм. I и J, Зависимая от концентрации индукция 11β-HSD1 (I, n = 5) и уменьшение LOX (J, n = 5 для мРНК, n = 7 для белка) кортизолом (0,01–1 мкМ) в фибробластах амниона человека. . Верхние панели E, I и J представляют собой репрезентативные иммуноблоты. ае — эпителиальные клетки амниона; af — фибробласты амниона; ct, трофобласты хориона. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводили с помощью парного теста Стьюдента t (E и K) или одностороннего теста ANOVA (I и J).*, P <0,05, **, P <0,01, ***, P <0,001 по сравнению с контролем или 0 мкМ.

Участие 11β-HSD1 в подавлении LOX кортизоном в фибробластах амниона человека

Иммунофлуоресцентное окрашивание показало, что 11β-HSD1 и LOX сосуществуют в цитоплазме фибробластов амниона (рис. 2, F – H), что дополнительно указывает на то, что кортизол, регенерированный 11β-HSD1, может влиять на экспрессию 11β-HSD1 и LOX аутокринным образом. Кортизол (0.01–1 мкМ) увеличивал белок 11β-HSD1 и уменьшал количество мРНК LOX и белка в зависимости от концентрации в фибробластах амниона (рис. 2, I и J). Из-за обильной экспрессии 11β-HSD1 в фибробластах амниона этот тип клеток обладает высокой способностью редуктазной активности превращать кортизон в кортизол (11). После 24-часовой инкубации более 90% кортизона превратилось в кортизол. Кортизон (5 мкМ) значительно снижал мРНК, белок и активность LOX (рис. 3, A – C), которые отменялись ингибиторами 11β-HSD1, включая CBX (1 мкМ, рис. 3A), 10j (1 мкМ, рис. 3B), и siRNA-опосредованный нокдаун 11β-HSD1 (рис. 3C).Эти результаты указывают на участие регенерации кортизола с прямой связью с помощью 11β-HSD1 в подавлении экспрессии LOX и предполагают, что изменения в 11β-HSD1 и LOX в ткани амниона после родов приписываются в основном изменениям в амнионе. фибробласты.

Рисунок 3

Участие 11β-HSD1 в подавлении LOX кортизоном в фибробластах амниона человека. A. Ослабление индуцированного кортизоном (5 мкМ) снижения мРНК и белка LOX под действием CBX-ингибитора 11β-HSD1 (1 мкМ) (n = 3).В. Ослабление индуцированного кортизоном (5 мкМ) снижения мРНК LOX и белка LOX ингибитором 11β-HSD1 10j (1 мкМ) (n = 3 для мРНК, n = 4 для белка). C. Ослабление индуцированного кортизоном (5 мкМ) снижения мРНК LOX, белка и активности посредством siRNA (50 нМ) -опосредованного нокдауна 11β-HSD1 (n = 5). Верхние панели A – C представляют собой репрезентативные иммуноблоты. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводился с помощью одностороннего теста ANOVA. *, P <0,05, ***, P <0,001 по сравнению с контролем или отрицательным скремблированным контролем siRNA; №, П <.05, ##, P <0,01, ###, P <0,001 по сравнению с одним кортизоном.

Фигура 3

Вовлечение 11β-HSD1 в подавление LOX кортизоном в фибробластах амниона человека. A. Ослабление индуцированного кортизоном (5 мкМ) снижения мРНК и белка LOX под действием CBX-ингибитора 11β-HSD1 (1 мкМ) (n = 3). В. Ослабление индуцированного кортизоном (5 мкМ) снижения мРНК LOX и белка LOX ингибитором 11β-HSD1 10j (1 мкМ) (n = 3 для мРНК, n = 4 для белка). C. Ослабление индуцированного кортизоном (5 мкМ) снижения мРНК LOX, белка и активности посредством siRNA (50 нМ) -опосредованного нокдауна 11β-HSD1 (n = 5).Верхние панели A – C представляют собой репрезентативные иммуноблоты. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводился с помощью одностороннего теста ANOVA. *, P <0,05, ***, P <0,001 по сравнению с контролем или отрицательным скремблированным контролем siRNA; #, P <0,05, ##, P <0,01, ###, P <0,001 по сравнению с одним кортизоном.

Роль PGE2 в ингибировании LOX кортизолом в фибробластах амниона человека

Недавно мы обнаружили, что PGE2 ингибирует экспрессию LOX в фибробластах амниона посредством связанного с рецептором EP2 / EP4 пути передачи сигналов цАМФ / PKA (35).Поскольку кортизол сильно стимулировал синтез PGE2 посредством индукции экспрессии cPLA2α и COX-2 в этом типе клеток (14-18), вполне вероятно, что PGE2 опосредует ингибирование экспрессии LOX кортизолом. Во-первых, мы подтвердили, что кортизол (0,01–1 мкМ) увеличивал уровни белка cPLA2α и COX-2 в зависимости от концентрации в фибробластах амниона (рис. 4A). Однако ингибирование фермента ЦОГ-2 с помощью NS398 (10 мкМ, Фигура 4В), комбинации антагонистов рецепторов ЕР2 и ЕР4 PF04418948 и L161982 (оба 10 мкМ, Фигура 4С), ингибирование связанного с рецепторами пути цАМФ / РКА с ингибитор PKA H89 (10 мкМ) и ингибитор аденилатциклазы SQ22536 (10 мкМ, фигура 4D) не смогли блокировать ингибирование экспрессии LOX кортизолом (1 мкМ), но те же концентрации антагонистов EP2 / EP4 отменяли ингибирование Обилие LOX PGE2 (1 мкМ, рис. 4C).Эти данные предполагают, что альтернативный и эффективный путь, который опосредует ингибирование LOX кортизолом, может существовать в фибробластах амниона.

Рисунок 4

Роль PGE2 в ингибировании LOX кортизолом в человеческих фибробластах амниона. A, Зависимая от концентрации индукция белка cPLA2α и ЦОГ-2 кортизолом (0,01–1 мкМ). B, ингибитор ЦОГ-2 NS398 (10 мкМ) не смог блокировать ингибирование мРНК и белка LOX кортизолом (1 мкМ) (n = 4 для мРНК). C.Влияние комбинации антагониста рецептора EP2 PF04418948 (PF; 10 мкМ) и антагониста рецептора EP4 L161982 (10 мкМ) на ингибирование мРНК и белка LOX кортизолом (1 мкМ) или PGE2 (1 мкМ) (n = 6 для мРНК, n = 4 для белка).D, Нарушение блокады индуцированного кортизолом (1 мкМ) ингибирования мРНК и белка LOX ингибитором PKA H89 (10 мкМ, n = 4 для мРНК) или ингибитором аденилатциклазы SQ22536 (10 мкМ, n = 6 для мРНК). Верхняя панель C представляет собой репрезентативные иммуноблоты. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводился с помощью одностороннего теста ANOVA (B – D). *, P <0,05, **, P <0,01, ***, P <0,001 по сравнению с контролем; ###, P <0,001 по сравнению с кортизолом.

Фигура 4

Роль PGE2 в ингибировании LOX кортизолом в фибробластах амниона человека.A, Зависимая от концентрации индукция белка cPLA2α и ЦОГ-2 кортизолом (0,01–1 мкМ). B, ингибитор ЦОГ-2 NS398 (10 мкМ) не смог блокировать ингибирование мРНК и белка LOX кортизолом (1 мкМ) (n = 4 для мРНК). C.Влияние комбинации антагониста рецептора EP2 PF04418948 (PF; 10 мкМ) и антагониста рецептора EP4 L161982 (10 мкМ) на ингибирование мРНК и белка LOX кортизолом (1 мкМ) или PGE2 (1 мкМ) (n = 6 для мРНК, n = 4 для белка). D, Нарушение блокады индуцированного кортизолом (1 мкМ) ингибирования мРНК и белка LOX ингибитором PKA H89 (10 мкМ, n = 4 для мРНК) или ингибитором аденилатциклазы SQ22536 (10 мкМ, n = 6 для мРНК).Верхняя панель C представляет собой репрезентативные иммуноблоты. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводился с помощью одностороннего теста ANOVA (B – D). *, P <0,05, **, P <0,01, ***, P <0,001 по сравнению с контролем; ###, P <0,001 по сравнению с кортизолом.

Роль GR в ингибировании LOX кортизолом в фибробластах амниона человека

Кортизол (1 мкМ) -индуцированное снижение мРНК LOX, белка и активности в фибробластах амниона было значительно устранено антагонистом GR RU486 (1 мкМ), а также посредством siRNA-опосредованного нокдауна GR (рис. 5, A и B).Более того, обработка кортизолом (1 мкМ) фибробластов амниона, трансфицированных плазмидой, несущей промотор LOX (от -850 до ∼ + 126 п.н. или от -450 до ∼ + 126 п.н.)-управляемый репортерный ген люциферазы, значительно ингибировала активность промотора ( Рисунок 6А). Это снижение активности промотора LOX кортизолом также блокировалось RU486 (1 мкМ, фиг. 6B) или siRNA-опосредованным нокдауном GR (фиг. 6B). Анализ ChIP показал, что обогащение GR в области промотора LOX , охватывающей предсказанный nGRE, было значительно увеличено кортизолом (1 мкМ, 24 ч) в фибробластах амниона (рис. 6C).Введение мутаций в предсказанный nGRE в диапазоне от -260 п.н. до -252 п.н. отменяет снижение активности промотора LOX кортизолом (1 мкМ, рис. 6D), тогда как введение мутаций в соседний элемент цАМФ-ответа на -332 примерно до 325 п.н. не оказали никакого влияния. Эти данные указывают на то, что кортизол ингибирует экспрессию LOX непосредственно через связывание GR с nGRE в его промоторе.

Фигура 5

Участие GR в ингибировании экспрессии LOX кортизолом в фибробластах амниона человека.A, ослабление индуцированного кортизолом (1 мкМ) снижения мРНК LOX, белка и активности RU486 (1 мкМ) (n = 5 для мРНК, n = 7 для белка, n = 3 для активности). B. Ослабление индуцированного кортизолом (1 мкМ) снижения мРНК LOX, белка и активности посредством siRNA (50 нМ) -опосредованного нокдауна GR (n = 5). Верхние панели A и B представляют собой репрезентативные иммуноблоты. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводился с помощью одностороннего теста ANOVA. *, P <.05, **, P <.01, ***, P <0,001 по сравнению с контролем или отрицательным скремблированным контролем siRNA; #, P <0,05, ##, P <0,01 по сравнению с кортизолом или только кортизолом.

Фиг. 5

Вовлечение GR в ингибирование экспрессии LOX кортизолом в фибробластах амниона человека. A, ослабление индуцированного кортизолом (1 мкМ) снижения мРНК LOX, белка и активности RU486 (1 мкМ) (n = 5 для мРНК, n = 7 для белка, n = 3 для активности). B. Ослабление индуцированного кортизолом (1 мкМ) снижения мРНК LOX, белка и активности посредством siRNA (50 нМ) -опосредованного нокдауна GR (n = 5).Верхние панели A и B представляют собой репрезентативные иммуноблоты. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводился с помощью одностороннего теста ANOVA. *, P <0,05, **, P <0,01, ***, P <0,001 по сравнению с контролем или отрицательным скремблированным контролем siRNA; #, P <0,05, ##, P <0,01 по сравнению с кортизолом или только кортизолом.

Фигура 6

Участие GR и nGRE в ингибировании активности промотора LOX кортизолом и рабочая модель, иллюстрирующая ингибирование LOX в фибробластах амниона человека.А. Ингибирование активности промотора LOX (от -850 п.н. до ∼ + 126 п.н., от -450 п.о. до ∼ + 126 п.н.) активностей кортизолом (1 мкМ) (n = 4). B, Блокада индуцированного кортизолом (1 мкМ) ингибирования активности промотора LOX (от -850 до ∼ + 126 пар оснований) с помощью RU486 (1 мкМ, n = 4) или siRNA (50 нМ, n = 5) -опосредованно разборка ГР. C. Повышенное обогащение GR промотором LOX , охватывающим предполагаемый nGRE, при стимуляции кортизолом (1 мкМ) фибробластов амниона человека, как измерено с помощью анализа ChIP (n = 4). TSS, сайт начала транскрипции.Fwd и Rev указывают положение выравнивания прямого праймера (Fwd) и обратного праймера (Rev). D, Отмена индуцированного кортизолом (1 мкМ) ингибирования активности промотора LOX (от -850 до ∼ + 126 п.н.) путем введения нуклеотидных мутаций (нуклеотиды в красном цвете) в предполагаемый nGRE (от -260 до -252 п.н.) но не нуклеотидными мутациями в соседнем CRE (от -332 до -325 п.н.) (нуклеотиды выделены красным цветом; n = 3). Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводили с помощью парного теста Стьюдента t (A, C и D) или одностороннего теста ANOVA (B).*, P <0,05, **, P <0,01 по сравнению с контролем или отрицательным скремблированным контролем siRNA; #, P <0,05 по сравнению с контролем или только кортизолом. E, рабочая модель, иллюстрирующая участие регенерации кортизола с прямой связью с помощью 11β-HSD1 в структурном ремоделировании амниона человека. К концу беременности накопление кортизола, регенерированного 11β-HSD1 в амнионе, не только индуцирует экспрессию 11β-HSD1, но также подавляет экспрессию LOX посредством GR-опосредованного ингибирования экспрессии LOX в фибробластах амниона.В то же время накопление кортизола также регулирует продукцию PGE2 за счет индукции экспрессии cPLA2α и COX-2. Повышенная продукция PGE2, в свою очередь, подавляет экспрессию LOX через рецепторы EP2 / EP4 в фибробластах амниона. Кортизол и PGE2 могут действовать скоординированным образом, вызывая резкое подавление экспрессии LOX к концу беременности, что приводит к снижению сшивки коллагена и ослаблению прочности амниона на разрыв. Снижение сшивки коллагена может также предрасполагать его к деградации матриксными металлопротеиназами (ММП), что дополнительно снижает прочность амниона на разрыв.Все эти эффекты могут быть связаны с ROM во время нормальных родов у людей. Преждевременная активация этого механизма прямой связи может привести к PPROM и преждевременным родам. Синие стрелки указывают на стимуляцию, а красные линии - на торможение. Е, кортизон; F, кортизол.

Фигура 6

Участие GR и nGRE в ингибировании активности промотора LOX кортизолом и рабочая модель, иллюстрирующая ингибирование LOX в фибробластах амниона человека. А. Ингибирование активности промотора LOX (от -850 п.н. до ∼ + 126 п.н., от -450 п.о. до ∼ + 126 п.н.) активностей кортизолом (1 мкМ) (n = 4).B, Блокада индуцированного кортизолом (1 мкМ) ингибирования активности промотора LOX (от -850 до ∼ + 126 пар оснований) с помощью RU486 (1 мкМ, n = 4) или siRNA (50 нМ, n = 5) -опосредованно разборка ГР. C. Повышенное обогащение GR промотором LOX , охватывающим предполагаемый nGRE, при стимуляции кортизолом (1 мкМ) фибробластов амниона человека, как измерено с помощью анализа ChIP (n = 4). TSS, сайт начала транскрипции. Fwd и Rev указывают положение выравнивания прямого праймера (Fwd) и обратного праймера (Rev). D, Отмена индуцированного кортизолом (1 мкМ) ингибирования активности промотора LOX (от -850 до ∼ + 126 п.н.) путем введения нуклеотидных мутаций (нуклеотиды в красном цвете) в предполагаемый nGRE (от -260 до -252 п.н.) но не нуклеотидными мутациями в соседнем CRE (от -332 до -325 п.н.) (нуклеотиды выделены красным цветом; n = 3).Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводили с помощью парного теста Стьюдента t (A, C и D) или одностороннего теста ANOVA (B). *, P <0,05, **, P <0,01 по сравнению с контролем или отрицательным скремблированным контролем siRNA; #, P <0,05 по сравнению с контролем или только кортизолом. E, рабочая модель, иллюстрирующая участие регенерации кортизола с прямой связью с помощью 11β-HSD1 в структурном ремоделировании амниона человека. К концу беременности накопление кортизола, регенерированного 11β-HSD1 в амнионе, не только индуцирует экспрессию 11β-HSD1, но также подавляет экспрессию LOX посредством GR-опосредованного ингибирования экспрессии LOX в фибробластах амниона.В то же время накопление кортизола также регулирует продукцию PGE2 за счет индукции экспрессии cPLA2α и COX-2. Повышенная продукция PGE2, в свою очередь, подавляет экспрессию LOX через рецепторы EP2 / EP4 в фибробластах амниона. Кортизол и PGE2 могут действовать скоординированным образом, вызывая резкое подавление экспрессии LOX к концу беременности, что приводит к снижению сшивки коллагена и ослаблению прочности амниона на разрыв. Снижение сшивки коллагена может также предрасполагать его к деградации матриксными металлопротеиназами (ММП), что дополнительно снижает прочность амниона на разрыв.Все эти эффекты могут быть связаны с ROM во время нормальных родов у людей. Преждевременная активация этого механизма прямой связи может привести к PPROM и преждевременным родам. Синие стрелки указывают на стимуляцию, а красные линии - на торможение. Е, кортизон; F, кортизол.

Обсуждение

Поскольку PPROM является одной из основных причин преждевременных родов, механизмы, лежащие в основе ROM, были тщательно исследованы с целью разработки стратегий эффективной борьбы с преждевременными родами.Несмотря на идентификацию структурного ремоделирования как наиболее яркого изменения, предшествующего ROM (21), основные причины все еще плохо изучены. Это исследование показало, что прямая регенерация кортизола с помощью 11β-HSD1 участвует в структурном ремоделировании ткани амниона за счет снижения перекрестного связывания коллагенов посредством подавления экспрессии LOX в фибробластах амниона человека. Наши результаты в амнионе сходны с данными о том, что повышенная регенерация кортизола с помощью 11β-HSD1 связана с атрофией кожи (33), что предполагает возможную генерализованную роль усиленной локальной регенерации глюкокортикоидов с помощью 11β-HSD1 в ремоделировании структуры интерстициальной ткани в тело.

Убедительные доказательства доказали, что глюкокортикоиды, полученные из надпочечников плода, вызывают начало родов у ряда видов животных, стимулируя синтез простагландинов в плаценте и увеличивая экспрессию фермента P450c17, который катализирует ключевой этап превращения прогестерона к эстрогенам (1, 4, 36). Взаимные изменения уровней эстрогена и прогестерона заставляют миометрий сокращаться за счет сократительных гормонов, тогда как увеличение простагландинов, особенно PGE2 и PGF2α, вызывает созревание шейки матки и сокращает миометрий (20, 37, 38).Это исследование продемонстрировало, что кортизол, полученный из 11β-HSD1 в амнионе человека, может играть роль, аналогичную глюкокортикоидам, продуцируемым в надпочечниках плода у других видов животных, в начале родов, хотя механизмы могут различаться у разных видов. В отличие от подавления синтеза простагландинов в большинстве других тканей (39), кортизол парадоксальным образом индуцирует экспрессию cPLA2α и COX-2, ключевых ферментов синтеза простагландина, в фибробластах амниона человека, как продемонстрировано в этом исследовании, а также в предыдущих исследованиях (14–14). 18).

Эта стимуляция синтеза простагландинов кортизолом в фибробластах амниона человека аналогична стимуляции синтеза простагландинов в плаценте животных (20). Однако, помимо хорошо описанной стимуляции синтеза простагландинов, это исследование предоставляет доказательства того, что кортизол также вызывает ремоделирование ВКМ в амнионе, эффект, который никогда не описывался при родах у животных. Интересно, что несмотря на то, что PGE2 ингибирует экспрессию LOX в фибробластах амниона, подавление экспрессии LOX кортизолом, по-видимому, не зависит от его стимуляции синтеза простагландинов.Скорее, прямое ингибирование экспрессии LOX кортизолом через стимуляцию связывания GR с nGRE в промоторе LOX существует в фибробластах амниона. Тем не менее, кортизол и PGE2 могут по-прежнему действовать согласованно in vivo, вызывая резкое подавление экспрессии LOX к концу беременности (31). Основываясь на результатах этого исследования, а также предыдущих исследований (14–18), мы полагаем, что накопление кортизола с помощью 11β-HSD1 в амнионе может быть вовлечено по крайней мере в два важных события, связанных с родами, т. Е. Ремоделирование внеклеточного матрикса и производство простагландинов.Однако следует иметь в виду, что изменения, наблюдаемые после родов, могут быть следствием или причиной родов. Принимая во внимание тот факт, что реципрокные изменения 11β-HSD1 и LOX происходят с гестационным возрастом до родов (13, 31), весьма вероятно, что эти изменения начинаются до родов и в дальнейшем усиливаются во время родов.

В заключение, прямая регенерация кортизола с помощью 11β-HSD1 к концу беременности может инициировать ряд событий, связанных с родами в амнионе, включая повышенную регуляцию продукции PGE2 (14, 34) и снижение регуляция экспрессии LOX.Продукция PGE2, в свою очередь, может усиливать подавление экспрессии LOX (35) (Рисунок 6E). Поскольку хорошо известно, что LOX катализирует перекрестное сшивание коллагенов, мы полагаем, что снижение экспрессии LOX приведет к снижению перекрестного сшивания коллагенов, что может в конечном итоге ослабить и разорвать плодные оболочки (Рисунок 6E). Таким образом, дальнейшие исследования влияния глюкокортикоидов на перекрестное связывание коллагена могут пролить больше света на роль регенерации кортизола в разрыве плодных оболочек.

Приложение

Последовательность антигена

Пептид / белок-мишень .	(если известна) .	Название антитела .	Производитель, номер по каталогу и / или имя лица, предоставляющего антитело .	Выращенные виды (моноклональные или поликлональные) .	Использованный раствор .
LOX		Anti-LOX	Abcam, ab174316	Rabbit	1: 500 для WB, 1: 100 для IF
GR		GR Santa21 Cruz Biotechnology, sc-1003	Кролик	1: 100
11β-HSD1		Anti-HSD11B1	Abcam, ab157223	Кролик	910 910 9102 910 910 910 910 910	Anti-HSD11B1	Origene, TA302508	Goat	1: 100
cPLA2α		cPLA2a	Santa Cruz Biotechnology, 1 1022 910 4521 910 910 910 910 4521 910 910 910 910 4521 910 CO. -2		COX-2	Santa Cruz Biotechnology, sc-1745	Goat	1: 500
Vimentin	9 1022	Виментин	Санта-Крус Биотехнология, sc-6260	Мышь	1: 100
Цитокератин		Цитокератин	Санта-Крус Биотехнология, sc-23108721	GAPDH		GAPDH-антитело	Proteintech, 60004-1	Mouse	1:10 000

Последовательность антигена

Пептид / белковая мишень .	(если известна) .	Название антитела .	Производитель, номер по каталогу и / или имя лица, предоставляющего антитело .	Выращенные виды (моноклональные или поликлональные) .	Использованный раствор .
LOX		Anti-LOX	Abcam, ab174316	Rabbit	1: 500 для WB, 1: 100 для IF
GR		GR Santa21 Cruz Biotechnology, sc-1003	Кролик	1: 100
11β-HSD1		Anti-HSD11B1	Abcam, ab157223	Кролик	910 910 9102 910 910 910 910 910	Anti-HSD11B1	Origene, TA302508	Goat	1: 100
cPLA2α		cPLA2a	Santa Cruz Biotechnology, 1 1022 910 4521 910 910 910 910 4521 910 910 910 910 4521 910 CO. -2		COX-2	Santa Cruz Biotechnology, sc-1745	Goat	1: 500
Vimentin	9 1022	Виментин	Санта-Крус Биотехнология, sc-6260	Мышь	1: 100
Цитокератин		Цитокератин	Санта-Крус Биотехнология, sc-23108721	GAPDH		GAPDH-антитело	Proteintech, 60004-1	Mouse	1:10 000

Последовательность антигена

Пептид / белковая мишень .	(если известна) .	Название антитела .	Производитель, номер по каталогу и / или имя лица, предоставляющего антитело .	Выращенные виды (моноклональные или поликлональные) .	Использованный раствор .
LOX		Anti-LOX	Abcam, ab174316	Rabbit	1: 500 для WB, 1: 100 для IF
GR		GR Santa21 Cruz Biotechnology, sc-1003	Кролик	1: 100
11β-HSD1		Anti-HSD11B1	Abcam, ab157223	Кролик	910 910 9102 910 910 910 910 910	Anti-HSD11B1	Origene, TA302508	Goat	1: 100
cPLA2α		cPLA2a	Santa Cruz Biotechnology, 1 1022 910 4521 910 910 910 910 4521 910 910 910 910 4521 910 CO. -2		COX-2	Santa Cruz Biotechnology, sc-1745	Goat	1: 500
Vimentin	9 1022	Виментин	Санта-Крус Биотехнология, sc-6260	Мышь	1: 100
Цитокератин		Цитокератин	Санта-Крус Биотехнология, sc-23108721	GAPDH		GAPDH-антитело	Proteintech, 60004-1	Mouse	1:10 000

Последовательность антигена

Пептид / белковая мишень .	(если известна) .	Название антитела .	Производитель, номер по каталогу и / или имя лица, предоставляющего антитело .	Выращенные виды (моноклональные или поликлональные) .	Использованный раствор .
LOX		Anti-LOX	Abcam, ab174316	Rabbit	1: 500 для WB, 1: 100 для IF
GR		GR Santa21 Cruz Biotechnology, sc-1003	Кролик	1: 100
11β-HSD1		Anti-HSD11B1	Abcam, ab157223	Кролик	910 910 9102 910 910 910 910 910	Anti-HSD11B1	Origene, TA302508	Goat	1: 100
cPLA2α		cPLA2a	Santa Cruz Biotechnology, 1 1022 910 4521 910 910 910 910 4521 910 910 910 910 4521 910 CO. -2		COX-2	Santa Cruz Biotechnology, sc-1745	Goat	1: 500
Vimentin	9 1022	Виментин	Санта-Крус Биотехнология, sc-6260	Мышь	1: 100
Цитокератин		Цитокератин	Санта-Крус Биотехнология, sc-23108721	GAPDH		GAPDH-антитело	Proteintech, 60004-1	Mouse	1:10 000

Благодарности

Текущий адрес C.G .: Отделение урологии, Детская больница, Бостон, EN1070, 300 Longwood Avenue, Boston, MA 02115.

Эта работа была поддержана грантами Национального фонда естественных наук Китая 81330018 и 81270704 и Национальной программой ключевых фундаментальных исследований Китая грантом 2014CB943302 .

Раскрытие информации Резюме: у авторов нет конфликта интересов, о котором следует сообщать.

Сокращения

BAPN
β-аминопропионитрил 500 мкМ
CBX
ChIP
иммунопреципитация хроматина
COX-2

COX-2

cPLA
cPLA

cy0004 cPLA ‘, 6’-диамино-2-фенилиндол

ECM
EP
рецептор простагландина E2
FBS
GAPDH
глицеральдегид
0
глицеральдегид-3-
11β-HSD1)
11β-гидроксистероид дегидрогеназа 1
LOX
nGRE
элемент отрицательного глюкокортикоидного ответа
PG
24 PKA
24 PG ПЦР
количественная ПЦР в реальном времени
90 329
ROM
siRNA
TL
TNL

Ссылки

Thorburn

Challis

Currie

Контроль родов домашних животных

Биол Репрод

1977

;

—

Ролингс

Уорд

Влияние гипофизэктомии плода на начало родов у козы

Дж Репрод Фертиль

1978

;

249

—

254

Ingram

Shaw

Renfree

Кортизол в жидкости плода и надпочечниках плода во время родов у таммарного валлаби ( Macropus eugenii )

Биол Репрод

1999

;

651

—

655

Лиггинс

Fairclough

Grieves

Kendall

74 JZ

Knox

Механизм инициирования родов у овцы

Последние данные Prog Horm Res

1973

;

111

—

159

Zhu

Myatt

Sun

Роль глюкокортикоидов в родах человека: спорный факт?

Плацента

2014

;

291

—

296

Liggins

Forster

Grieves

Schwartz

Контроль родов у мужчин

Биол Репрод

1977

;

—

Мезиано

Jaffe

Биология развития и функциональная биология коры надпочечников плода приматов

Endocr Ред.

1997

;

378

—

403

Мерфи

Хорионическая мембрана как экстраадреналовый источник кортизола плода в околоплодных водах человека

Природа

1977

;

266

179

—

181

Мерфи

Онтогенез взаимопревращения кортизола-кортизона в тканях человека: роль кортизона в развитии плода человека

Дж Стероид Биохим

1981

;

811

—

817

.10

Сан

Ян

Challis

Дифференциальная экспрессия 11β-гидроксистероиддегидрогеназы типов 1 и 2 в плаценте человека и плодных оболочках

Дж. Клин Эндокринол Метаб

1997

;

300

—

305

.11

Sun

Myatt

Усиление глюкокортикоид-индуцированной экспрессии 11β-гидроксистероиддегидрогеназы типа 1 провоспалительными цитокинами в культивируемых фибробластах амниона человека

Эндокринология

2003

;

144

5568

—

5577

.12

Ян

Guo

Zhu

Myatt

, Солнце

Роль глюкокортикоидного рецептора и CCAAT / связывающего энхансера белка альфа в прямой индукции экспрессии 11β-гидроксистероиддегидрогеназы типа 1 кортизолом в фибробластах амниона человека

Дж Эндокринол

2007

;

195

241

—

253

,13

Alfaidy

MacIntosh

Yang

Challis

Увеличение экспрессии 11β-гидроксистероиддегидрогеназы 1 в плодных оболочках человека на поздних сроках беременности: новый внутриутробный источник кортизола

Дж. Клин Эндокринол Метаб

2003

;

5033

—

5038

,14

Sun

млн лет назад

Cui

и др. .

Глюкокортикоиды индуцируют цитозольную фосфолипазу A2 и простагландин H-синтазу типа 2, но не микросомальную простагландин E-синтазу (PGES) и цитозольную экспрессию PGES в культивируемых первичных клетках амниона человека

Дж. Клин Эндокринол Метаб

2003

;

5564

—

5571

.15

Кейси

MacDonald

Mitchell

Несмотря на значительное увеличение секреции кортизола у женщин во время родов, наблюдается столь же значительный рост синтеза простагландинов. Парадокс?

Дж. Клин Инвест

1985

;

1852

—

1857

,16

Zakar

Hirst

Mijovic

Olson

Глюкокортикоиды стимулируют экспрессию эндопероксида простагландина H-синтазы-2 в клетках амниона

Эндокринология

1995

;

136

1610

—

1619

,17

Zhu

Ян

Guo

и др.

Парадоксальная стимуляция экспрессии циклооксигеназы-2 глюкокортикоидами через элемент ответа на циклический АМФ в фибробластах амниона человека

Мол эндокринол (Балтимор, Мэриленд)

2009

;

1839

—

1849

.18

Guo

Myatt

Zhu

Sun

Индукция Gαs способствует парадоксальной стимуляции экспрессии цитозольной фосфолипазы A2α кортизолом в фибробластах амниона человека

Молекулярная эндокринология (Балтимор, Мэриленд)

2010

;

1052

—

1061

,19

Guo

Wang

Liu

Myatt

Sun

Индукция синтеза PGF2α кортизолом через GR-зависимую индукцию CBR1 в фибробластах амниона человека

Эндокринология

2014

;

155

3017

—

3024

.20

Challis

Щелок

Gibb

Простагландины и роды

Энн Нью-Йорк Академия наук

1997

;

828

254

—

267

,21

Парри

Штраус

3-й.

Преждевременный разрыв плодных оболочек

N Engl J Med

1998

;

338

663

—

670

.22

Slattery

Morrison

Преждевременные роды

Lancet (Лондон, Англия)

2002

;

360

1489

—

1497

,23

Лю

Johnson

Cousens

и др. .

Глобальные, региональные и национальные причины детской смертности: обновленный систематический анализ за 2010 г. с указанием временных тенденций с 2000 г.

Lancet (Лондон, Англия)

2012

;

379

2151

—

2161

.24

Oyen

Calvin

Landers

Преждевременный разрыв плодных оболочек: является ли амнион главным определяющим фактором?

Am J Obstet Gynecol

2006

;

195

510

—

515

0,25

Борн

Оболочки плода.Обзор анатомии нормального амниона и хориона и некоторых аспектов их функции

Postgrad Med J

1962

;

193

—

201

0,26

Андерсон

Флинт

Тернбулл

Механизм действия глюкокортикоидов в индукции оплодотворения овец: влияние на метаболизм стероидов в плаценте

Дж Эндокринол

1975

;

—

.27

Menon

Fortunato

Роль ферментов, разрушающих матрикс, и апоптоза в разрыве мембран

Исследование J Soc Gynecol

2004

;

427

—

437

,28

Malak

Ockleford

Bell

Dalgleish

Bright

N Macvicar

Дж

Конфокальная иммунофлуоресцентная локализация коллагена типов I, III, IV, V и VI и их ультраструктурная организация в плодных оболочках доношенного человека

Плацента

1993

;

385

—

406

,29

Vater

Harris

Jr,

Siegel

Нативные поперечные связи в фибриллах коллагена вызывают устойчивость к синовиальной коллагеназе человека

Biochem J

1979

;

181

639

—

645

.30

Стюарт

Эванс

Лин

Пауэрс

Пониженные концентрации коллагена и аскорбиновой кислоты и повышенная протеолитическая восприимчивость с разрывом плодных оболочек перед родами у женщин

Биол Репрод

2005

;

230

—

235

.31

Кейси

MacDonald

Экспрессия лизилоксидазы (ras recision gene) в амнионе человека: онтогенез и клеточная локализация

Дж. Клин Эндокринол Метаб

1997

;

167

—

172

.32

Hoyes

Строение и функции амниона

Акушер Гинекол Анну

1975

;

—

.33

Тиганеску

Тахрани

Morgan

и др. .

Блокада 11β-гидроксистероиддегидрогеназы предотвращает возрастные дефекты структуры и функции кожи

Исследование J Clin

2013

;

123

3051

—

3060

.34

Ван

Guo

Zhu

и др. .

Фосфорилирование STAT3 опосредует индукцию циклооксигеназы-2 кортизолом в человеческом амнионе при родах

Научный сигнал

2015

;

ra106

.35

Liu

Zhu

Wang

и др. .

Ингибирование лизилоксидазы простагландином E2 через рецепторы EP2 / EP4 в фибробластах амниона человека: последствия для родов

Молекулярный эндокринол

2016

;

424

118

—

127

,36

Currie

Thorburn

Роль плода в определении времени начала родов у козы

Ciba Found Symp

1977

—

0,37

Линдберг

Возбуждение родов путем внутривенной инфузии простагландина F2α

Простагландины

1977

;

993

—

1004

.38

Challis

Sloboda

Alfaidy

и др..

Простагландины и механизмы преждевременных родов

Репродукция

2002

;

124

—

.39

Rhen

Cidlowski

Противовоспалительное действие глюкокортикоидов — новые механизмы для старых лекарств

N Engl J Med

2005

;

353

1711

—

1723

Мужчина убил 6 человек, затем убил себя на вечеринке по случаю дня рождения в Колорадо, стреляя

Бандит открыл огонь на вечеринке по случаю дня рождения в Колорадо, убив шестерых взрослых, прежде чем покончить с собой, сообщила полиция.

По сообщению полиции, стрельба произошла сразу после полуночи в парке передвижных домов на восточной стороне Колорадо-Спрингс.

Офицеры прибыли в трейлер и обнаружили шестерых мертвых взрослых и человека с серьезными травмами, который позже скончался в больнице, сообщает Colorado Springs Gazette.

Подозреваемый в стрельбе был бойфрендом женщины-жертвы на вечеринке, на которой присутствовали друзья, семья и дети. По словам полиции, он вошел внутрь и открыл огонь, прежде чем выстрелить в себя.

По заявлению полиции, празднование дня рождения было посвящено одному из убитых.

Соседка Йенифер Рейес рассказала The Denver Post, что проснулась от множества выстрелов.

«Я думал, что это гроза», — сказал Рейес. «Потом я начал слышать сирены».

Полиция вытащила детей из трейлера и поместила их по крайней мере в одну патрульную машину, сказала она, добавив, что дети «истерически плакали».

Власти утверждают, что дети, не пострадавшие в результате нападения, были помещены к родственникам.

Полиция в воскресенье не разглашала ни личности стрелка, ни жертв.Власти говорят, что мотив не был известен сразу.

«Мое сердце разбивается о семьях, потерявших любимого человека, и о детях, потерявших родителей», — сказал в своем заявлении начальник полиции Колорадо-Спрингс Винс Ниски.

Это был самый массовый расстрел в Колорадо с тех пор, как вооруженный преступник убил 10 человек в супермаркете в Боулдере 22 марта.

«Трагическая стрельба в Колорадо-Спрингс является разрушительной, — сказал в воскресенье губернатор Джаред Полис, — особенно потому, что многие из нас проводят день, прославляя женщин в нашей жизни, которые сделали нас теми, кем мы являемся сегодня.”

Колорадо-Спрингс с населением 465 000 человек — второй по величине город Колорадо после Денвера.

В 2015 году мужчина застрелил трех человек наугад перед смертью в перестрелке с полицией в Колорадо-Спрингс на Хэллоуин. Менее чем через месяц мужчина убил трех человек, в том числе полицейского, и ранил еще восемь человек в результате стрельбы в городской клинике планирования семьи.

Эксперимент по обращению старения Эллен Лангер

Дэвид Джонс / Flickr

Идея о том, что стареть — значит становиться слабым и забывчивым, настолько укоренилась в нашем культурном понимании старения, что бывает трудно разделить медицинские реалии и простые предубеждения в отношении пожилых людей.Но Эллен Лангер, психолог из Гарварда, давно хотела попробовать.

«Социальные условия могут способствовать тому, что может ошибочно казаться необходимыми последствиями старения», — предположил Лангер в книге «Старость: артефакт?» 1981 года. В конце концов, так называемые «моменты старости» — это компетенция не только пожилых людей. «Молодые глупые люди также часто бывают забывчивыми».

Сколькими негативными эффектами старения можно манипулировать и даже стереть с помощью психологического вмешательства?

В ходе радикального эксперимента 1979 года, который прошлой осенью был опубликован на обложке журнала New York Times Magazine, Лангер и ее аспиранты решили развить этот вопрос, насколько это возможно.

Результаты были экстраординарными, но исследование было настолько необычным, настолько маленьким и настолько лишенным строгости, что интерпретация того, что именно означают эти результаты, требует осторожности.

Исследование «против часовой стрелки»

Представьте на мгновение, что вы живете в доме престарелых. Вы едите в кафетерии, отдыхаете по расписанию, и вы окружены другими пожилыми людьми, в основном незнакомцами. У вас отняли автономию, может быть, даже вашу личность — те самые вещи, которые делают вас вами , могут быть больше связаны с вашим прошлым, чем с вашим настоящим, и никто больше не ожидает от вас многого.

Идет загрузка.

Независимо от вашего возраста, это не та среда, в которой процветает большинство людей.Но Лангер подумал, что, может быть, просто возможно, если бы вы могли поместить людей в психологически лучшую обстановку — такую, которую они бы ассоциировали с лучшей, более молодой версией себя, — их тела могли бы последовать за ними. «Куда бы вы ни направили разум, вы обязательно поместите тело», — объяснила она много лет спустя на канале CBS This Morning.

Д.Ли Пеффер II / Flickr

Поскольку на самом деле Лангер не могла отправить пожилых людей в прошлое, она решила перенести прошлое в настоящее. «Мы воссоздали бы мир 1959 года и попросили бы испытуемых жить так, как если бы он был двадцатью годами ранее», — написала она в своей книге «Против часовой стрелки» 2009 года.

Как именно это работало? Вот как Брюс Грирсон описал начало этого эксперимента в журнале The New York Times Magazine:

Восемь мужчин в возрасте 70 лет вышли из фургона перед переоборудованным монастырем в Нью-Гэмпшире.Они поползли вперед, некоторые из них сгорбились от артрита, двое с тростью. Затем они прошли через дверь и вошли в искривление времени. Перри Комо напевал по старинному радио. Эд Салливан приветствует гостей по черно-белому телевизору. Все внутри — включая книги на полках и лежащие вокруг журналы — было создано, чтобы вызывать 1959 год.

Мужчины не просто вспоминали, как все было в то время (это сделала контрольная группа). Им было приказано вести себя так, как если бы это было на самом деле 1959, в то время как контрольная группа жила в аналогичной среде, но не действовала так, как если бы это было несколько десятилетий назад.

Они обсуждали исторические события, как если бы они были текущими новостями, и не было сделано никаких положений, которые признавали бы ослабленное физическое состояние мужчин; никто не нес их сумки, не помогал им подниматься по лестнице и не обращался с ними, как с старыми.

«Ничто — ни зеркала, ни современная одежда, ни фотографии, кроме портретов их гораздо более молодых людей — не испортили иллюзию того, что они избавились от 22-летнего возраста», — писал Грирсон.

Неделю спустя и контрольная группа, и экспериментальная группа показали улучшение «физической силы, ловкости рук, походки, осанки, восприятия, памяти, познания, вкусовой чувствительности, слуха и зрения», — написал Лангер в «Против часовой стрелки».»

И, согласно отчету Лангера, большинство этих улучшений были гораздо более значительными в группе, которой велели жить так, как будто это на самом деле 1959 год; полные 63% из них имели лучшие результаты тестов интеллекта в конце эксперимента, чем они. вначале по сравнению с 44% в контрольной группе. Четыре независимых добровольца, которые ничего не знали об исследовании, смотрели на фотографии мужчин в экспериментальной группе до и после и воспринимали фотографии «после» как в среднем на два года моложе тех, что были в «раньше».«

В последний день исследования, писал Лангер, мужчины, «которые казались такими слабыми» всего за несколько дней до этого, в конечном итоге сыграли «импровизированный футбольный матч на лужайке перед домом».

Кадр из фильма «Плезантвиль», в котором двое подростков 1990-х годов оказались в ловушке ситкома, действие которого происходит в 1958 году.YouTube / Скриншот

В некотором смысле результаты не должны удивлять. Грирсон пишет, что Лангер на самом деле сказал участникам: «У нас есть веские основания полагать, что если вам это удастся, вы почувствуете себя так же, как в 1959 году».

Когда вы полагаете, что что-то повлияет на вас определенным образом, это часто случается. Вот почему плацебо-контроль используется в каждом тщательном клиническом исследовании.

Ваши собственные ожидания и ожидания других сильны. И ожидания снижения когнитивных и физических способностей, которые приходят с возрастом, повсеместны.

Но, как отметила Ребекка Тухус-Даброу в разделе «Идеи Бостонского глобуса», в рассказе о силе плацебо, «есть пределы даже для самого сильного эффекта плацебо. Никакая симуляция, конечно, не может выявить сломанную руку или очистить ее. закупорка артерии. Как правило, оказывается, что плацебо влияет на симптомы, а не на основные заболевания.«

Тем не менее, Лангер, похоже, восприняла результаты «против часовой стрелки» как дополнительное подтверждение своих теорий о власти разума над телом, даже как топливо для своего аргумента о том, что, как она писала в 1981 году, «многие из последствий старости. могут быть определены с экологической точки зрения и, таким образом, потенциально могут быть обращены вспять посредством манипуляций с окружающей средой ».

Спустя годы она осталась убежденной. «Эти результаты в некотором роде поразительны», — сказал Лангер в документальном фильме Би-би-си 2010 года.«Помните, старикам должно быть только хуже».

Наука … или трюк?

Flickr / Дерек Ки

Лангер много раз говорила и писала о своем эксперименте «против часовой стрелки» за прошедшие десятилетия.Она предложила наиболее подробный отчет об этом в главе книги Oxford University Press, которую она совместно редактировала.

Однако полученные данные никогда не публиковались в рецензируемых журналах. И они никогда не были воспроизведены, за исключением трюков, сделанных для телевидения.

«Чувствительность Лангера может противоречить суровости современного академического сообщества», — написал Грирсон в статье в журнале The New York Times Magazine. «Иногда она придает равное значение случайно выдвинутым идеям и рецензируемым исследованиям.«

Эллен Лангер.

Роберт Скобл / Википедия

В интервью о своей обложке Грирсон признал, что, хотя неортодоксальные методы Лангера могут вызывать удивление, они также должны вызывать скептицизм.«Она все еще очень далека от этой работы», — сказал он. «Людей не убедят, пока это не будет воспроизведено в строго контролируемых условиях. И не должно быть».

Джеймс Койн, давний психолог из Пенсильванского университета и неутомимый скептик, идет еще дальше:

«Идентификация Эллен Лангер как выдающегося, хорошо известного гарвардского психолога — важная часть ее брендинга и продвижения себя … Тем не менее, она не берет на себя никакой ответственности, связанной с тем, чтобы быть ученым », — утверждает он в критическом ответе на статью Грирсона в блоге Science-Based Medicine.«Она не всегда отправляет свою работу на рецензирование. Она ссылается на неопубликованные исследования, даже на те, которые оставались таковыми в течение многих лет … Лангер публиковалась в научных журналах, но в остальном она не действует как ученый».

Койн не согласен не только с неопубликованным экспериментом против часовой стрелки, но и с некоторыми другими работами Лангер, особенно с ее планами проверить свои теории в предстоящем исследовании больных раком, которым будет велено жить так, как будто это 2003 год, прежде чем они имелись какие-либо признаки болезни.

Как пишет Грирсон, «позитивная психология не имеет большого опыта в борьбе с раком».

Заглядывая в будущее

СМИ и широкая общественность, кажется, особенно увлечены исследованием против часовой стрелки — интуитивно привлекательным в обществе, которое так боится старения, — но это, конечно, лишь часть карьеры Лангера, продолжавшейся десятилетия.

Хотя есть множество веских причин для того, чтобы скептически относиться к ее самому известному эксперименту (и, как утверждает Койн, ко многим другим), выводы из большей части работ Лангера остаются убедительными:

Внимательность
(осознанное осознание настоящего момента и сосредоточение на нем) важно; нельзя сбрасывать со счетов эффекты плацебо; и доказательства подтверждают преимущества уверенности в том, что люди сохраняют свободу воли и независимость по мере взросления.

Так что, если мы не можем повернуть время вспять? Наша жизнь не обязательно должна быть им продиктована.

On 29.05.2021 By admin

Разное

32 вывода к 32 годам

32 вывода к 32 годам. Точнее, сразу после | by Alexander Zdrok

32 вывода к 32 годам

Страшно всем.

Жизни без перемен не существует.

Быстро — это медленно, но без перерыва.

Создавать больше, чем потреблять.

Сегодня — это то, что ты делал и думал вчера, а завтра — это то, что ты делаешь и думаешь сегодня.

Никаких гарантий нет.

Эпоха сокровенных знаний, которые могут что-то изменить, закончена.

Радость и удовольствие — не одно и то же.

Страдания существуют.

Быть счастливыми могут не все.

Радость — это равновесие ума.

Фрукты — не кислотная, а щелочная еда.

«Мое тело само знает, что ему лучше» — одна из самых коварных ловушек ума.

Питание влияет не только на наше тело, но и на наше сознание.

Денег нужно столько, чтобы о них не думать.

Мы все одинаковые намного больше, чем разные.

Зависимость лечится только 100% отказом.

Состояния внутренней 100% готовности к переменам не существует.

Жизнь — это книга, первые главы которой были написаны не тобой.

Результат — это количество попыток.

То, что тебе помогало на одном этапе может оказаться тормозом для выхода на следующий.

За зоной комфорта находится зона дискомфорта.

Жизни без цели не существует.

Лени — не существует.

Себя невозможно найти, себя можно только создать.

Алкоголь не нужен.

Банки должны платить тебе, а не ты им.

Две способности, которыми нужно овладеть, как можно раньше: умение напрягаться и умение расслабляться.

Два ответа, которым нужно научиться, как можно раньше: «Да» и «Нет».

Крутые штуки отличаются от хороших способностью делающего забывать себя.

Каждый встреченный на пути знак всегда имеет минимум 3 толкования.

32 вывода к 32 годам | Golbis

32 вывода к 32 годам

32 вывода к 32 годам — ОБРАЗ ЖИЗНИ|психология,отношения,общество|цитаты

Is Covid Pandemic Over?

Читайте также

О чем истерит женщина?

Житель Парижа Антуан Лейрис, супруга которого погибла в одном из терактов, случи…

Выcкaзывания cтaрeйшего в мирe психoтерапевта — Ирвинa Ялома, кoтoрыe дeйствуют кaк хoлодный дyш.

Когда не хватает тепла,

Вoт пожилой мужчина, стоя у пекарни, звонит жене:

Лучшие книги о спокойствии и душевном равновесии:

Я от таких женщин балдею…

Почему всего лишь однa фрaзa может спaсти брaк?

Тайное завещание Мастера.

Что отталкивает людей от Вас?

ЗАКОН ОТРАЖЕНИЯ

Правила жизни от Вадима Зеланда в цитатах:

Правила общения с мужем

Пocтавить жизнь нa паузу

«Я не знаю, как заканчивается любовь»

Мама, дай мне понять, что я всегда могу к тебе обратиться.

Mнe oдна учитeльницa чрезвычайнo понравилаcь — онa мoю дoчку в первoм клаcсе учи…

​​Пять лет назад я работала в салоне бизнес-класса, где было прекрасно и дорого….

Было три внука у одной бабушки.

Раньше мне всегда было больно отпускать людей. Я пыталась спасти наши отношения,…

Сегодня я ошиблась номером и нечаянно послала моему отцу сообщение “Я тебя люблю…

Давай я расскажу, как любит мужчина…

Однажды мой отец высказал пронзительную и страшную мысль:

32 вывода к 32 годам — Тятя.ру

Значение сочетания сывороточного карциноэмбрионального антигена и ПЭТ / КТ в прогнозировании мутации EGFR при немелкоклеточном раке легкого — Gu

Введение

Методы

Пациенты и критерии включения

ПЭТ / КТ сканирование

Анализ данных ПЭТ

Статистический анализ

Результаты

Характеристики пациентов и их связь с

Связь между мутациями SUVmax и EGFR

Связь между CEA и

Многомерный анализ

Обсуждение

Выводы

Благодарности

Список литературы

Пять лет назад я работала в салоне бизнес-класса, где было прекрасно и дорого….